[发明专利]共有前列腺抗原、编码所述抗原的核酸分子以及包含所述核酸分子的疫苗及其用途

说明书

发明领域

本发明涉及编码共有前列腺蛋白及其片段的核酸分子；改进的前列腺癌疫苗、改进的用于诱导针对前列腺癌细胞的免疫反应的方法、改进的用于预防性和/或治疗性免疫个体以抗前列腺癌的方法。

发明背景

前列腺癌是重要治疗免疫靶。免疫治疗法的发展非常复杂，因为需要开发能够诱导强免疫反应，包括优选CTL反应的免疫原。

已研究了直接施用核酸序列以针对动物和人疾病接种疫苗，并且许多努力集中在核酸递送的有效和高效方法，以产生期望的抗原的必需表达，从而导致免疫原性反应和最终该技术的成功。

DNA疫苗具有许多优于常规接种法例如活减毒病毒和基于重组蛋白质的疫苗的概念上的有利方面。DNA疫苗是安全的，稳定的，容易产生的，并且在人中可被良好地耐受的，临床前试验显示几乎无质粒整合的证据[Martin,T.,等人,质粒DNA疟疾疫苗:肌内注射后基因组整合的潜能.Hum Gene Ther,1999.10(5):第759-68页；Nichols,W.W.,等人,至宿主基因组内的潜在DNA疫苗整合.Ann N Y Acad Sci,1995.772:第30-9页]。此外，DNA疫苗因疫苗的效力不受预先存在的针对载体的抗体滴度的影响的事实而十分适合重复施用[Chattergoon,M.,J.Boyer和D.B.Weiner,基因免疫：疫苗和免疫治疗剂的新纪元.FASEB J,1997.11(10):第753-63页]。然而，DNA疫苗的临床采用的一个主要障碍一直以来为当转移至更大的动物时平台的免疫原性减弱[Liu,M.A.和J.B.Ulmer,质粒DNA疫苗的人临床试验.Adv Genet,2005.55:第25-40页]。DNA疫苗免疫原的工程的最近技术进展例如密码子最优化、RNA最优化和免疫球蛋白前导序列的添加已提高了DNA疫苗的表达和免疫原性[Andre,S.,等人,通过利用具有最优化的密码子选择的合成gp120序列进行DNA接种引发的增强的免疫反应.J Virol,1998.72(2):第1497-503页；Deml,L.,等人,密码子选择最优化对编码人免疫缺陷病毒1型Gag蛋白DNA候选疫苗的表达和免疫原性的多重效应.J Virol,2001.75(22):第10991-1001页；Laddy,D.J.,等人,基于共有序列的抗禽流感新型DNA疫苗的免疫原性.Vaccine,2007.25(16):第2984-9页；Frelin,L.,等人,密码子最优化和mRNA扩增有效地增强丙型肝炎病毒非结构3/4A基因的免疫原性.Gene Ther,2004.11(6):第522-33页]。

质粒递送系统的最近技术进步已提高了DNA疫苗的表达和免疫原性，包括技术例如电穿孔[Hirao,L.A.,等人,通过电穿孔进行的真皮内/皮下免疫提高了质粒疫苗在猪和猕猴中的递送和潜能.Vaccine,2008.26(3):第440-8页；Luckay,A.,等人,质粒DNA疫苗设计和体内电穿孔对猕猴中所得的疫苗特异性免疫反应的效应.J Virol,2007.81(10):第5257-69页；Ahlen,G.,等人,体内电穿孔通过增加的局部DNA摄入增强丙型肝炎病毒非结构3/4A DNA的免疫原性、蛋白质表达、炎症和CD3+T细胞的浸润.J Immunol,2007.179(7):第4741-53页]。

此外，研究已表明共有免疫原的使用可以能够相较于单独的天然抗原增加细胞免疫反应的宽度(breadth)[Yan,J.,等人,由基于工程HIV-1亚型B共有序列的包膜DAN疫苗引发的增强的细胞免疫反应.Mol Ther,2007.15(2):第411-21页；Rolland,M.,等人,人免疫缺陷病毒1型蛋白的祖先树中心的构建和功能.J Virol,2007.81(16):第8507-14页]。然而，应承认打破癌症抗原的免疫耐受性和产生自身免疫是癌症疫苗的主要障碍。

仍然需要编码前列腺癌抗原的核酸构建体和用于诱导抗前列腺癌抗原的免疫反应，从而打破免疫耐受性的组合物。仍然存在对经济有效的抗前列腺癌的有效的预防性和治疗。

优选实施方案的概述