[发明专利]使用重组细胞进行戊糖的生物制备

权利要求书

1.一种制备戊糖的方法，所述方法包括：

(a)培养重组细胞，所述重组细胞包含(i)编码DXS和/或DXR多肽的异源核酸，和/或(ii)编码DXS和/或DXR多肽的内源核酸一个或多个拷贝，其中所述细胞在适合制备戊糖的条件下培养，以及

(b)制备所述戊糖。

2.根据权利要求1所述的方法，其中所述重组细胞还包含(iii)编码磷酸酶的异源核酸，和/或(ii)编码磷酸酶的内源核酸一个或多个拷贝。

3.根据权利要求2所述的方法，其中所述戊糖选自2-甲基赤藓醇(2-ME)和1-脱氧木酮糖(1-DX)。

4.根据权利要求3所述的方法，其中所述戊糖为2-甲基赤藓醇(2-ME)。

5.根据权利要求4所述的方法，其中所述重组细胞能够制备累计滴度为至少约20g/L的2-ME。

6.根据权利要求4所述的方法，其中所述重组细胞能够制备累计滴度为至少约30g/L的2-ME。

7.根据权利要求4所述的方法，其中所述重组细胞能够制备累计滴度为至少约45g/L的2-ME。

8.根据权利要求1所述的方法，其中所述重组细胞还包含一种或多种编码DXP途径多肽但与DXS和/或DXR多肽不同的异源核酸，和/或(ii)编码DXP途径多肽但与DXS和/或DXR多肽不同的内源核酸的一个或多个拷贝。

9.根据权利要求8所述的方法，其中所述DXP途径多肽为IspG。

10.根据权利要求9所述的方法，其中所述IspG多肽为T.elongates IspG多肽。

11.根据权利要求9所述的方法，其中所述IspG多肽为大肠杆菌IspG多肽。

12.根据权利要求8所述的方法，其中所述重组细胞还包含编码铁硫簇相互作用氧化还原多肽的核酸。

13.根据权利要求12所述的方法，其中所述铁硫簇相互作用氧化还原多肽选自铁氧还蛋白和黄素氧还蛋白。

14.根据权利要求1所述的方法，其中所述重组细胞还包含至少一种编码异戊烯二磷酸δ异构酶(IDI)多肽的异源核酸或编码IDI多肽的内源核酸的至少一个拷贝。

15.根据权利要求1所述的方法，其中所述重组细胞为细菌细胞、藻类细胞、真菌细胞或酵母细胞。

16.根据权利要求15所述的方法，其中所述细胞为细菌细胞。

17.根据权利要求16所述的方法，其中所述细菌细胞为革兰氏阳性菌细胞或革兰氏阴性菌细胞。

18.根据权利要求17所述的方法，其中所述细菌细胞选自大肠杆菌、柠檬泛菌、枯草芽孢杆菌、地衣芽孢杆菌、迟缓芽胞杆菌、短芽孢杆菌、嗜热脂肪芽孢杆菌、嗜碱芽孢杆菌、解淀粉芽孢杆菌、克劳氏芽孢杆菌、耐盐芽孢杆菌、巨大芽孢杆菌、凝结芽孢杆菌、环状芽孢杆菌、灿烂芽孢杆菌、苏云金芽孢杆菌、白色葡萄球菌、变铅青链霉菌、天蓝色链霉菌、灰色链霉菌、假单胞菌属某种和产碱假单胞菌细胞。

19.根据权利要求18所述的方法，其中所述细菌细胞为大肠杆菌细胞。

20.根据权利要求1所述的方法，其中所述DXP途径酶选自DXS、DXR、MCT、CMK、MCS、HDR(IspH)和IDI。

21.根据权利要求20所述的方法，其中所述另外的DXP途径酶选自DXS、DXR、HDR(IspH)和IDI。

22.根据权利要求1所述的包含重组细胞的细胞培养物，其中所述细胞培养物产生至少约45g/L的2-ME。