[发明专利]一种生产血液来源蛋白质注射制剂的方法，以及使用上述方法获得的蛋白质物料

说明书

本发明涉及一种生产血液来源的蛋白物料的注射级药用剂型产品的方法，包括以下步骤：将聚合物/盐双水相系统中的原物料在苯酚中分级，通过辛酸沉淀纯化系统上层水相，然后通过热凝法纯化系统下层水相，通过层析增加双相中物料纯度，通过对两种制备产物进行纳米过滤来去除病毒颗粒、成型、稳定化和包装获得的物料。

技术领域

本发明涉及对治疗用蛋白纯化领域，特别是生产血液来源的病毒载量降低的注射级蛋白产品剂型的方法，例如免疫球蛋白和/或白蛋白。

背景技术

血浆来源制品，例如人白蛋白、人免疫球蛋白和异源抗蛇毒血清是治疗许多疾病、事故和受伤的重要药物。由于目前对这些制品的需求量增加，因此改进生产方法效率以提供足够的药品来满足需求是很重要的，这可避免这类药物在短期内的全球供应短缺情况。

为获得血液来源的蛋白制品，特别是血浆，目前已有一些方法。其中我们可看到一些方法：

1.血浆分级

Cohn血浆分级法(冷醇分级)是血浆来源的生物制品行业使用的最常见方法(参见see Cohn EJ,Strong LE,Hughes WL,Mulford DJ,Ashworth JN,Mel in M.,Taylor HL1946.Preparation and properties of serum and plasma proteins.IV.A system forthe separat ion into fract ions of the protein and lipoprotein components ofbiological t issue and fluids,Journal of the American Chemical Society,68:459-475)。为改进原始方法的生产成本和效能相关方面，一些研究人员已提出在工艺中采用反应性较低或抑制性步骤的改进方案(参见Hink J.,Hidalgo J.,Seeberg V.,JohnsonFF 1957.Preparation and properties of a heat-treated human plasma proteinfraction.VoxSanguinis 2:174-186；Kistler,P,Nitschmann,H.1962.Large ScaleProduction of Human plasma Fractions”,VoxSanguinis 7:414-424,Schneider,W.,Wolter,D.,McCarty,L.1976.Alternativesfor PlasmaFractionation.VoxSanguinis,(31)2:141-151)。而且，其它的改进方案提示基于使用沉淀剂、一种或多种层析步骤或其组合将其并入纯化方法。最常使用的沉淀剂为硫酸铵、聚乙二醇和辛酸。

2.使用双水相系统(ATPS)的血浆分级

已有报道使用双水相系统(ATPS)用于具有高商业价值化合物的初级回收和分级。ATPS由聚合物-聚合物、聚合物-盐和盐-醇混合物组成，并已用于生物制品(例如蛋白、基因材料)细胞或其细胞器、有机物，例如香料和染料、重金属和某些药物的初级回收和部分纯化(参见Benavides,J.,Rito-Palomares,M.2008.Review:Practical experiences fromthe development of two-phase Aqueous Processes for the recovery of high valuebiological products.J ChemTechnolBiotechnol 3:133-142；Huddleston,J.,A.Veide,K.Kohler,J.Flanagan,S-0.Enfors and A.Lyddiat.1991.The molecular basis ofpartitioning in Aqueous two-phase systems.Tibtech9:381-388))。