[发明专利]嗅介蛋白-4蛋白（OLFM4）在结肠直肠癌诊断中的用途

说明书

结肠直肠癌是第三种最常见类型的癌症，并且是西方世界癌症相关死亡的第二位首要原因，全球每年有655,000例死亡。因而，结肠直肠癌患者的管理以及最佳治疗方案的选择是重要的健康问题。选择恰当的治疗对患者很重要，以及出于健康经济学的原因也很重要。

对于结肠直肠癌疗法的主要选择是手术和或化疗，其取决于个体患者的肿瘤分期和不同年龄和共患因素（cobormibidity）。

肿瘤科医生遇到两种类型的情况：

1、在局部原发性肿瘤的情况，主要问题是手术后辅助化疗的指征。为了防止继发的转移，选择需要重的攻击性初始化疗方案的预后不良的肿瘤很重要。否则，患者的生存可能受到高度损害。例如，在侵入性近端淋巴结的情况下，5年的继发转移风险是70%。另一方面，当不需要时给手术增加攻击性辅助化疗，可导致不利的毒副作用，其可能显著地影响患者的生活质量或者甚至影响其自身生命。另外，由于患结肠直肠癌患者的年龄中位数是69，通常伴有共患疾病的这些患者对严重的毒副作用具有更高的风险。

此外，创新的靶向疗法非常昂贵（每个月大约5,000欧元），并且仅应该在需要的时候以及功效机会大的时候使用。

2、50%的患有结肠直肠癌的患者将继发转移，仅能用化疗剂和靶向疗法治疗。这些药物的功效常常被肿瘤细胞抗性机制损害，例如，传导信号蛋白或转录因子过度表达或突变，从而导致肿瘤的增殖或生存。因而，为了能够选择适合的治疗，非常需要一种新的测试，其允许评估特定结肠直肠肿瘤的抗性因子。

总之，为了便于鉴定1）真正需要辅助化疗或2）需要优化的化疗方案的肿瘤，仍然存在对鉴定和表征可信赖的肿瘤预后标记物或抗性预测因子的需要。

对治疗的肿瘤抗性最常意味着传导信号或抗凋亡蛋白过度表达或突变。

参与MAP激酶传导信号的最重要的蛋白质之一是KRAS。KRAS是大鼠肉瘤病毒（ras）致癌基因家族（包括KRAS、HRAS、和NRAS）的成员之一，其编码作为主要细胞内信号传导因子发挥作用的二磷酸鸟苷（GDP）和三磷酸鸟苷（GTP）结合蛋白RAS。被GTP结合以及活化后，RAS募集致癌基因RAF，RAF使MAP2K-1（促分裂原活化的蛋白激酶激酶-1）和MAP2K-2磷酸化，从而启动MAPK（促分裂原活化的蛋白激酶）信号传导，其最终导致在细胞生长、分化和生存中起重要作用的蛋白质表达。KRAS、BRAF、或PIK3CA中的突变导致下游RAS–MAPK或PI3K通路的连续活化。这样的活化继而增强参与异常细胞周期进展的各种致癌基因的转录，包括MYC、AP1、CREB、和NF-κB（7、8、9）。

KRAS是人类癌症中常见的突变致癌基因之一。特别地，在30-40%的肿瘤中发现了KRAS突变，其与APC一起代表了参与引发结肠直肠癌的身体变化之一。该突变发生在癌发生（carcinogenesis）过程的早期，并在疾病进展的各个阶段维持，例如涉及结转移（node involvement）和转移扩散。涉及大量患者的最近研究证实了突变KRAS与结肠直肠癌进展中的较差结果相关，该效果在II期和III期疾病中更显著（Nash等人,Ann.Surg.Oncol.,17:416-424,2010）。同一研究小组在另一研究中（Nash等人,Ann.Surg.Oncol.,17:572-578,2010）表明KRAS突变与更快速的攻击性的结肠直肠肝转移的转移行为相关。

另外，已报道KRAS突变在转移的结肠直肠癌中诱导药物抗性，并使靶向表皮生长因子受体（EGFR）疗法的治疗失败。KRAS突变给予对西妥昔单抗和帕尼单抗的抗性（Allegra等人,J.Clin.Oncol.,27:2091-2096,2008;Linardou等人,Lancet Oncol.,9:962-972,2008）。因而，在选择靶向疗法之前需要在转移的结肠直肠癌中进行KRAS基因分型，在抗EGFR药物施用前野生型Kras基因是必须的。

事实上，Kras是肿瘤抗性的基石。KRAS突变不仅仅负责对西妥昔单抗和帕尼单抗的抗性，最近还表明其给予了对铂衍生剂、奥沙利铂的结肠直肠肿瘤抗性（Richman等人.,J Clin Oncol,27(35):5866-5867,2009）。而且，如果在KRAS突变肿瘤的治疗中向伊立替康添加抗EGFR靶向药物没有效果，或者阳性或者阴性，则向奥沙利铂添加所述药物导致有害作用（Douillard等人.,J Clin Oncol,28(31):4697-47052010）。