[发明专利]L-甲硫氨酸的制备方法

权利要求书

1.L-甲硫氨酸前体与甲硫醇的酶促转化以获得L-甲硫氨酸的方法，其中在反应容器中在反应介质上方的甲硫醇分压范围为10kPA-180kPA、优选51kPa-180kPa、更优选51kPa-160kPa、还更优选约80kPa-约160kPa、有利地约90kPa-约150kPa，例如CH₃SH分压为约100kPa-150kPa，在反应温度下。

2.权利要求1的方法，其中所述反应温度范围为20℃-45℃、优选25℃-40℃、还更优选30℃-40℃。

3.前述权利要求任一项的方法，其中所述L-甲硫氨酸前体为O-琥珀酰基高丝氨酸(OSHS)和O-乙酰基高丝氨酸(OAHS)，且优选为OAHS。

4.前述权利要求任一项的方法，其中用于所述酶促转化的酶使用根据生物技术工艺的基因表达制备。

5.前述权利要求任一项的方法，其中用于所述酶促转化的酶选自源自假单胞菌属菌种(Pseudomonas sp.)、色杆菌属菌种(Chromobacterium sp.)、钩端螺旋体属菌种(Leptospira sp.)、或生丝单胞菌属菌种(Hyphomonas sp.)的胱硫醚-γ-合酶或O-乙酰基高丝氨酸硫化氢解酶或O-琥珀酰基高丝氨酸硫化氢解酶。

6.前述权利要求任一项的方法，其中反应的pH维持在约中性或稍微酸性的值，优选反应介质的pH维持在6-7。

7.前述权利要求任一项的方法，其中加入辅酶，所述辅酶优选为吡哆醛-5'-磷酸。

8.用于制备L-甲硫氨酸的方法，包括如下步骤：

1)制备产生L-甲硫氨酸前体的菌株且通过所述菌株的发酵产生L-甲硫氨酸前体；

2)根据权利要求1-7任一项的酶促转化方法将所述L-甲硫氨酸前体转化为L-甲硫氨酸；

3)收集获得的L-甲硫氨酸。

9.权利要求8的方法，其中所述产生L-甲硫氨酸前体的菌株是能够积累L-甲硫氨酸前体的原核或真核微生物菌株。

10.权利要求9的方法，其中所述菌株选自埃希氏菌属菌种(Escherichiasp.)、欧文氏菌属菌种(Erwinia sp.)、沙雷氏菌属菌种(Serratia sp.)、普罗威登斯菌属菌种(Providencia sp.)、棒状杆菌属菌种(Coryne bacteria sp.)、假单胞菌属菌种、钩端螺旋体属菌种、沙门氏菌属菌种(Salmonellar sp.)、短杆菌属菌种(Brevibacteria sp.)、生丝单胞菌属菌种、色杆菌属菌种和诺卡氏菌属菌种(Norcardia sp.)微生物或真菌或酵母。

11.权利要求9或10的方法，其中所述菌株在包括多种碳源、氮源和痕量元素的培养基中获得。

12.根据权利要求11的方法，其中所述碳源选自葡萄糖、蔗糖、乳糖、果糖、麦芽糖、淀粉、纤维素；脂肪例如大豆油、向日葵油、蓖麻油和椰子油；脂肪酸如棕榈酸、硬脂酸和亚油酸；醇例如甘油和乙醇；与有机酸如乙酸；以及它们的混合物。