[发明专利]3－氯－1，2－丙二醇及其脂肪酸酯含量的检测方法

说明书

技术领域

本发明属于分析化学领域，具体涉及一种3-氯-1，2-丙二醇及其脂肪酸酯含量的检测方法。 

背景技术

3-氯-1，2-丙二醇及其脂肪酸酯是在食品加工过程中产生的、不易引起人们的注意、但会对广大消费者的健康产生危害的物质。其对人体的危害表现在：①3-氯-1，2-丙二醇的急、慢性毒性：3-氯-1，2-丙二醇的大鼠经口半数致死量LD₅₀为150mg/kg.bw。雄性大鼠连续经口染毒3-氯-1，2-丙二醇1mg/kg/day以上剂量时，可以出现精子活动减弱和生殖力降低，剂量大于或等于10-20mg/kg/day，可见大鼠的精子有显著的形态学改变和附睾损伤；②3-氯-1，2-丙二醇的遗传毒性：目前大多数研究机构和学者认为3-氯-1，2-丙二醇属于非遗传毒性致癌物，暂定每日最大耐受量(TDI)为2μg/kg.bw；③3-氯-1，2-丙二醇的致癌性：英国致癌委员会(Committee on carcinoginicity)认为，3-氯-1，2-丙二醇在动物实验中会引起致癌；而英国致变异委员会(Committee on Mutagenicity)认为，3-氯-1，2-丙二醇在体内实验中，是一个非基因毒性的致癌物质；④3-氯-1，2-丙二醇的神经毒性：小鼠和大鼠对3-氯-1，2-丙二醇的神经毒性作用敏感性相同，尤其是对脑干的对称性损伤。当3-氯-1，2-丙二醇染毒剂量大于25mg/kg.bw/day时，实验动物中枢神经系统损伤呈现显著的剂量效应关系。 

由于3-氯-1，2-丙二醇对人体健康的危害，欧盟在2001年制订了限量标准，规定不得超过每日20μg/kg.bw的摄入量；我国也建立了检测酱油中3-氯-1，2-丙二醇的国家标准。由于3-氯 -1，2-丙二醇的危害性较大，在食品中要求的安全限为ppb级，且食品中的含量一般也在此级别，因此目前一般都采用灵敏度高的GC-MS方法检测。虽然3-氯-1，2-丙二醇脂肪酸酯的危害性还无定论，但它在一定条件下很容易水解生成3-氯-1，2-丙二醇，因此油脂样品除需检测游离的3-氯-1，2-丙二醇外，还需检测3-氯-1，2-丙二醇脂肪酸酯的含量。常用的3-氯-1，2-丙二醇检测方法是先将3-氯-1，2-丙二醇进行衍生，衍生方法有酮类衍生、硼酸类衍生(苯基硼酸、丁基硼酸)、N，O-双三甲基-三氟乙酰胺(BSTFA)、酸酐类衍生、七氟丁酰咪唑(HFBI)等；衍生后再进行GC-MS检测。3-氯-1，2-丙二醇脂肪酸酯可通过酯交换反应变成3-氯-1，2-丙二醇后进行检测。虽然GC-MS是目前采用的最主要的方法，但此方法存在着仪器昂贵、维护使用费用高、需氘代标样作为内标物、对使用者业务能力要求高等缺陷，极大地限制了此检测方法的推广应用，使得相关产品中增加3-氯-1，2-丙二醇残留量指标成为空谈。 

发明内容

本发明所要解决的一个技术问题是提供一种操作方便、成本较低的3-氯-1，2-丙二醇含量的检测方法。 

为解决上述技术问题，本发明采用的技术方案包括以下步骤： 

1)氧化：将水溶液中的3-氯-1，2-丙二醇氧化为氯乙醛； 

2)衍生化：将氯乙醛与衍生试剂反应生成具有荧光效应的物质； 

3)检测：采用HPLC-FLD方法进行检测，即可得3-氯-1，2-丙二醇的含量。 

所述步骤1)中，可用但不限于用高碘酸钠作为氧化剂。优选地，所述高碘酸钠的浓度为0.01-0.1mol/L，添加量为所述3-氯-1，2-丙二醇水溶液体积的10-80％，反应温度为5-30℃，反应时间为10-120min。 

所述步骤2)中的衍生试剂包括但不限于鸟嘌呤、腺嘌呤、巯基鸟嘌呤、胞嘧啶，其相应核苷及核苷酸。所述衍生试剂的浓度为 0.002-0.02mol/L，反应温度为37-100℃，反应时间为10-240min。 

所述步骤3)中HPLC采用反相色谱模式，固定相包括但不限于反相ODS、C12或C8填料，流动相包括但不限于甲醇-水或乙腈-水体系，比例为5％：95％-100％：0％；FLD激发波长为260-320nm，检测波长为350-470nm。 

所述3-氯-1，2-丙二醇水溶液可以是经如下步骤处理动植物油脂产品制得： 

a)称取油脂产品质量； 

b)加入己烷和含NaCl的乙酸溶液进行萃取，弃去上层有机相； 

c)用己烷重复萃取一次，弃去上层有机相。