[发明专利]OCT4B蛋白异构体的新用途

说明书

技术领域

本发明涉及生物技术领域，尤其涉及一种OCT4B蛋白异构体的新用途。

背景技术

OCT4是由POU5F1基因编码的一类同源域转录因子，典型的OCT4主要表达于胚胎干细胞、生殖干细胞和具有分化潜能的畸胎瘤细胞中，是维持胚胎干细胞自我更新能力与全能性的关键转录因子。OCT4的缺失或者过量表达都会引起胚胎干细胞的分化。同时，OCT4也是体外诱导全能干细胞技术中最为关键的因子。

人的OCT4基因可以通过选择性剪切形成三种mRNA异构体，OCT4A，OCT4B1和OCT4B。其中OCT4A可以生成典型的360个氨基酸的OCT4A蛋白，对维持ES细胞自我更新和多能性起关键作用。OCT4B1可以通过剪切形成OCT4B，并且被预测可产生一类截断的蛋白。OCT4B可以产生多个异构体，其中OCT4B-190被证明在细胞应激条件下具有抗凋亡功能，而其他异构体(如OCT4-265，OCT4-164)的生物学功能大多还不能明确。

发明内容

本发明的一个目的是提供OCT4B-265蛋白的一种应用。

本发明提供的应用为OCT4B-265蛋白在制备细胞凋亡促进剂中的应用或在制备预防和/或治疗肿瘤的药物中的应用；所述OCT4B-265蛋白为如下1)或2)：1)序列表中序列1所示的氨基酸序列组成的蛋白质；

2)将序列表中序列1所示的氨基酸序列经过一个或几个氨基酸残基的取代和/或缺失和/或添加且具有相同功能的由序列1衍生的蛋白质。

上述一个或几个氨基酸残基的取代和/或缺失和/或添加是指为了满足不同机体内蛋白高表达而进行不多于十个氨基酸残基的取代和/或缺失和/或添加。

上述应用中，2)所示OCT4B-265蛋白为序列表中序列3所示的氨基酸序列组成的蛋白质；所述细胞凋亡是由细胞凋亡引发剂引起的；所述细胞凋亡引发剂为具有基因毒性的刺激物；所述具有基因毒性的刺激物具体为丝裂霉素C。

上述应用中，所述细胞为表达OCT4B-265蛋白的离体细胞，所述肿瘤为乳腺癌；

所述表达OCT4B-265蛋白的离体细胞具体为内源表达OCT4B-265蛋白的离体细胞和外源表达OCT4B-265蛋白的离体细胞；

所述内源表达OCT4B-265蛋白的离体细胞具体为离体的人胚胎干细胞hES(H9)、离体的人畸胎瘤PA-1或离体的畸胎瘤细胞NTERA-2；

所述外源表达OCT4B-265蛋白的离体细胞具体为将OCT4B-265蛋白的编码基因导入宿主细胞中，得到转基因细胞。

上述应用中，所述应用为将OCT4B-265蛋白的编码基因导入宿主细胞中，得到转基因细胞；所述转基因细胞的细胞凋亡率大于所述宿主细胞。

上述应用中，所述OCT4B-265蛋白的编码基因的核苷酸序列为序列表中序列4或序列表中序列2；所述宿主细胞为离体的乳腺癌细胞系MCF-7。

上述应用中，所述OCT4B-265蛋白的编码基因通过含有OCT4B-265蛋白的编码基因的重组腺病毒导入宿主细胞，上述重组腺病毒可由北京诺赛基因公司合成。

上述OCT4B-265蛋白在促进细胞凋亡中的应用也是本发明保护的范围。

含有上述OCT4B-265蛋白的编码基因的重组载体或重组腺病毒也是本发明保护的范围。

本发明的另一个目的是提供抑癌基因p53的抑制剂的一个应用。

本发明提供的应用为在抑癌基因p53的抑制剂在制备细胞凋亡抑制剂或抑制细胞凋亡的应用也是本发明保护的范围。

在上述应用中，所述抑癌基因p53的抑制剂为核苷酸A；所述核苷酸A为由序列表中序列5所示的正向序列和序列表中序列6所示的反向序列组成的双链核苷酸。

在上述应用中，所述抑制细胞凋亡通过降低细胞中所述OCT4B-265蛋白表达量实现；

在上述应用中，所述细胞为表达OCT4B-265蛋白的离体细胞，所述表达OCT4B-265蛋白的离体细胞具体为将OCT4B-265蛋白的编码基因导入宿主细胞中，得到转基因细胞；所述宿主细胞具体为离体的乳腺癌细胞系MCF-7。

在上述应用中，所述应用为将上述的核苷酸A导入上述转基因细胞中，得到目的细胞；所述目的细胞凋亡率小于所述转基因细胞。

本发明的第三个目的是提供一种抑制细胞中OCT4B-265蛋白表达的方法。