[发明专利]一种番茄青枯病拮抗菌及其应用

说明书

技术领域

本发明涉及番茄青枯病生防领域，尤其涉及一株番茄青枯病拮抗菌及其应用。 

背景技术

番茄青枯病是由茄青枯拉尔氏菌[Ralatonia solanacearum (smith) Yabuuchi et al]引起的世界范围内的毁灭性土传病害，热带、亚热带的国家和地区，如：南美洲、日本、印度、菲律宾，我国台湾、广东、浙江、福建、江苏、湖北、四川、重庆等都有严重发生。该病可造成植株大面积萎蔫死亡，一般田块发病率为10%～15%，重病田发病率高达80%～98.5%，导致番茄产量严重下降，造成重大的经济损失。 

R. solanacearum 是一种土壤习居菌，能够在无寄主情况下的土壤中存活很长时间。R. solanacearum主要从根系侵入植株，也可从茎部伤口侵入并直接进入导管系统，在其中大量繁殖并产生代谢物质，阻碍植物体内水分运输，造成植株萎蔫。目前，针对番茄青枯病缺少有效的化学药剂，加之青枯菌对化学农药易产生抗药性，而且大量使用化学农药会造成环境污染和生产成本上升。休耕期撒施石灰可减轻病害发生，但易造成土壤板结。抗病育种工作，由于缺乏理想的抗源材料，进展缓慢。水旱轮作要求轮作年限长，且附近无其它宿主存在方可起到良好效果，因而实施起来较困难。土壤灭菌后形成了土壤生物真空，一旦土壤受到病原菌侵染，会导致病原菌的大爆发而造成更为严重后果。生物防治作物病害具有可利用资源丰富、成本低廉、能够避免环境二次污染，被认为是解决土传病害一条有希望的途径。利用病原菌拮抗微生物进行生物防治是生物防治的一个重要组成部分。 

发明内容

本发明目的在于针对番茄青枯病缺少有效的化学药剂，加之青枯菌对化学农药易产生抗药性的不足，提供一种番茄青枯病拮抗菌及其应用。 

本发明目的通过以下技术方案来实现：一种番茄青枯病拮抗菌，它的16S rRNA具有SEQ ID No.1所示的基因序列；该番茄青枯病拮抗菌保存在中国专利局指定的保藏单位中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保存编号为：CGMCC No.3332。 

上述番茄青枯病拮抗菌在防治番茄青枯病方面的应用。 

本发明的有益效果是，本发明分离筛选出的番茄青枯病拮抗菌能够有效地防治番茄青枯病，对减少大量化肥、农药的使用，减轻农业面源污染具有重要的作用。 

本发明的番茄青枯病拮抗菌④-37已在中国专利局指定的保藏单位“中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心”保藏，保藏单位地址为：北京市朝阳区大屯路；保藏日期为2009年10月9日，保藏编号为：CGMCC No.3332；分类命名为：蜡状芽孢杆菌(Bacillus cereus)。 

附图说明

    图1为番茄青枯病生防效果图。  

具体实施方式

从浙江嘉善、丽水、杭州等番茄种植基地采集21个土样，利用牛肉膏蛋白胨培养基进行分离，共分离到细菌420多株；然后进行平板拮抗试验，得到对番茄青枯病茄青枯拉尔氏菌有较好拮抗效果初筛细菌27株；通过盆栽试验，进一步筛得对番茄青枯病茄青枯拉尔氏菌具有相对稳定的拮抗效果复筛细菌4株。该菌株④-37为其中一株细菌。根据菌株的形态特征、培养特征和生理生化特征，参照伯杰氏细菌鉴定手册，对该菌株④-37进行鉴定，初步确认为蜡状芽孢杆菌，该菌株取样来自浙江丽水。 

保藏菌株的形态、培养、生理、生化等特征： 

蜡状芽孢杆菌④-37：属蜡状芽孢杆菌（Bacillus cereus）；在牛肉膏蛋白胨培养基中生长良好，细胞杆状；在牛肉膏蛋白胨琼脂平板上培养时菌落表面湿润、光滑、边缘整齐且规则、圆形，菌苔厚、不透明、白色。菌株④-37理化试验结果见下表：

经测定，菌株④-37的16S rRNA的基因序列如SEQ ID No.1所示。

通过以下实施例对本发明作更详细说明，但以下实施例仅是说明性的，本发明并不受这些实施例的限制。 

对所涉材料的说明： 

蛋白胨：生化制剂，国产；

牛肉膏：生化制剂，国产；

Yeast extract (酵母浸膏):生化试剂，国产；

Casein hydrolysate (酪蛋白水解物): 生化试剂，国产；

琼脂: 生化试剂，国产；

NaCl：分析纯，国产

K₂HPO₄：分析纯，国产；

葡萄糖：分析纯，国产；