[发明专利]3-乙酰氨基-7-羟基-6-甲氧基香豆素衍生物、制备方法及其用途

说明书

技术领域

本发明涉及3-乙酰氨基-7-羟基-6-甲氧基香豆素衍生物、制备方法及其用途。

背景技术

恶性肿瘤是当前危害人类健康的重要疾病之一。目前认为，肿瘤的生长取决于两类细胞，肿瘤细胞和肿瘤血管内皮细胞，抑制任何一类的细胞生长的药物都具有抗肿瘤作用。前者就是以细胞毒药物为主的肿瘤化学治疗，后者就是抗血管生成治疗。化学疗法治疗肿瘤常因耐药性使其疗效受到一定的限制，而抗血管生成治疗直接作用于肿瘤的内皮细胞，基本上很少产生或不产生耐药性。

东莨菪素(Scopoletin)又称东莨菪内酯、莨菪亭，属于香豆素类化合物，化学名为7-羟基-6-甲氧基香豆素。它存在于茄科植物东莨菪(Swpolia japonica Maxim.)根，颠茄(Atropa balladonna L.)，伞形植物兴安白芷(Angelica dahurica Benth.et Hook.)根等中。研究表明，东莨菪素具有明显的药理活性，如镇痛、抗炎、降血压、解痉、抗肿瘤和防治高尿酸血症等方面活性，具有很重要的药用价值。

文献报道东莨菪素具有抗肿瘤活性，能诱导肿瘤细胞凋亡[Life Sciences，2005，77：824-836；Phytochemistry，1995，39(2)：383-385]。东莨菪素对PC3、PAA和Hela细胞的IC₅₀分别为157、154和294mg/L。东莨菪素能时间和浓度依赖性地抑制PC3细胞的增殖，并引起细胞内蛋白质含量减少和酸性磷酸酶(ACP)活性降低。经东莨菪素0，100，200和400mg/L处理后PC3细胞的凋亡率分别为0.3％，2.1％，9.3％和35％，G2期细胞显著减少[Acta Pharmacol Sin，2001，22(10)：929-933]。

东莨菪素是含有酚羟基的香豆素类化合物，对内皮细胞的活化及所引起的血管生成具有多种作用[Drug Development Research，2009，70(3)：214-219]。东莨菪素对内皮细胞无毒性作用，但在浓度为62.5、125、250和500μM时，可抑制内皮细胞迁移和抑制大鼠尾胶原管的形成，并且仅适度地抑制内皮细胞的增殖和粘附。特别是东莨菪素浓度为500μM时，可选择性的下调纤溶酶诱导的ERK1/2的磷酸化作用，而不影响内皮细胞p38的MAPK或JNK的磷酸化作用。这些研究结果证明：东莨菪素具有抗血管生成活性，主要表现为通过下调ERK1/2的活化，从而抑制内皮细胞的迁移和抑制尾胶原管的形成。

东莨菪素虽然具有抗肿瘤活性，但是在体内不稳定，代谢快，作用时间短，限制其临床用途。

发明内容

本发明的目的在于提供一种新的具有药用价值的3-乙酰氨基-7-羟基-6-甲氧基香豆素衍生物。

本发明的目的还在于提供一种3-乙酰氨基-7-羟基-6-甲氧基香豆素衍生物的制备方法。

本发明的另一目的在于提供一种药物，具有抗肿瘤的作用。

详细发明内容如下：

本发明合成了一系列通式(I)化合物：

R代表氢、卤素、烷烃、硝基、甲氧基、乙酰基。

部分化合物的结构为：

通式I化合物制备方法，为取代的氯乙酰氨基苯与3-乙酰氨基-6-甲氧基-7羟基香豆素反应制得。

具体反应步骤为：

I_1-12的合成路线

(a)AlCl₃CH₂Cl₂，rt，24h；(b)甘氨酸，醋酸钠，醋酐，回流4h；(c)K₂CO₃，甲醇，回流0.5h；(d)K₂CO₃，取代的氯乙酰氨基苯，丙酮，回流2h.

以下是本发明部分化合物的药理学实验数据：

体外抗肿瘤活性筛选，筛选项目为MCF-7和MDA-MB-231人乳腺癌细胞，以及HT-29人结直肠癌细胞。

实验方法：

(1)MCF-7、MDA-MB-231和HT-29细胞以7500cells/mL接种于96孔板，每孔100μL，孵育3天；

(2)加入不同浓度的化合物，继续孵育3天

(3)细胞用1％的戊二醛溶液固定，并在4℃存放与磷酸盐缓冲液中。

(4)细胞由龙胆紫染色，乙醇冲洗后，在590nm下用光度计测量细胞菌体量。