[发明专利]一种产胆盐水解酶乳酸菌干粉发酵剂的制备方法

说明书

技术领域

本发明涉及产胆盐水解酶乳酸菌干粉发酵剂的制备方法，适用于功能性酸奶及益生菌制剂等发酵乳制品干粉发酵剂的生产。

背景技术

开菲尔是以牛乳或羊乳为原料，添加含有乳酸菌和酵母菌的开菲尔粒发酵剂，经发酵酿制而成的一种传统酒精发酵乳饮料。目前工业化生产的开菲尔乳品是以牛乳为原料，利用从开菲尔粒(又称藏灵菇)中分离的乳酸菌和酵母菌进行发酵制得。开菲尔起源于俄罗斯北高加索地区，当地牧民将牛乳或山羊乳注入羊皮口袋经自然发酵生产酸乳酒，其残留物再补加牛乳或山羊乳继续发酵，经长期发酵后在皮口袋中形成不规则颗粒状物体，即为开菲尔粒。此后人们便直接将开菲尔粒添加到牛乳中，使之发酵成具有爽快酸味和起泡性的保健饮料，即为开菲尔。

开菲尔乳品中含有消化吸收效果好的乳蛋白质和乳脂肪，其中有益菌群将牛乳中的乳糖大部分水解为对人体有益的L(+)-乳酸，只生成极少量的D(-)-乳酸。据测定，开菲尔中D(-)-乳酸的含量仅为2％～5％，远低于普通酸奶的25％～60％，故开菲尔乳品适于乳糖不耐症者饮用。同时，开菲尔中的L(+)-乳酸可改善人体对钙、磷、铁的吸收，且可提高人体中B族维生素(VB1、VB2、VB6、VB12、叶酸、尼克酸等)的含量。一些研究证实，开菲尔乳品具有较好的降血脂和降血糖的功效，并对结核病具有治疗效果。此外，开菲尔乳品中含有抑制癌细胞增殖的荚膜多糖和溶解癌细胞的四碳二羧酸，可降低癌症的发病率。同时还有降低血清胆固醇含量，增强肝脏功能，提高机体免疫力和抗衰老作用。开菲尔粒中的活菌对结核分枝杆菌、大肠杆菌、志贺氏菌、沙门氏菌等病原菌均有强烈的抑制作用。

乳酸菌是开菲尔粒中含量最多、最具活力的一部分菌群，属于益生菌，主要存在于人体肠道。当其在人体肠道中达到一定数量时，能够改善或调节肠道微生物菌群的平衡。乳酸菌的代谢产物可以降低肠道内的pH，抑制肠道中的腐败菌生长和减弱腐败菌在肠道的产毒作用，并有助于帮助消化，预防便秘，防止细胞老化，增强机体免疫力，降低血清胆固醇水平，缓解乳糖不耐症及抑制肿瘤细胞的形成等。

早在1963年人们就证实摄取含有某种乳杆菌或者双歧杆菌发酵的酸奶具有降低血清胆固醇含量的功效。迄今为止，国内外学者对乳酸菌降胆固醇作用机理的研究尚存在不同观点，主要集中于以下三点：1.乳酸菌菌体细胞直接吸收同化胆固醇；2.乳酸菌的胆盐水解酶活性使结合态胆盐降解为游离态胆盐，后者溶解度下降与胆固醇发生共同沉淀作用；3.其他理论，如吸收同化与共沉淀联合作用。

本发明所用干酪乳杆菌KL1、乳酸乳球菌乳亚种KS4和嗜热链球菌Tx作为益生菌，可在生长代谢过程中产生大量高活力的胆盐水解酶，经过体外牛津杯试验和动物实验证明有降低机体血清胆固醇含量的功效。

目前，国内申请各种发酵剂制备方法的专利较多，如天津科技大学肖冬光和汪建明申请的“益生乳酸菌发酵剂的制备方法及其在新鲜干酪中的应用”(CN1560231)是制备直接添加于酸奶、干酪等发酵乳制品中的益生乳酸菌发酵剂；哈尔滨美华生物技术股份有限公司张柏林和吴荣荣申请的“德氏乳杆菌保加利亚亚种酸奶或发酵乳干粉发酵剂”(CN1628528)是利用单一的德氏乳杆菌保加利亚亚种制备用于酸奶或其他发酵乳生产的发酵剂；陕西师范大学张富新和雷长鹏申请的“羊奶酸奶专用发酵剂的制备方法”(CN102113556A)是利用从商品牛奶酸奶中分离所得的乳酸菌制备羊奶酸奶专用发酵剂。但关于利用分离筛选自藏灵菇的产胆盐水解酶的乳酸菌，利用自动发酵罐高密度培养，并制备干粉发酵剂的方法未见国内外相关文献报道和专利报道。

发明内容

本发明的目的在于提供利用干酪乳杆菌KL1、乳酸乳球菌乳亚种KS4和嗜热链球菌Tx三株产胆盐水解酶的菌种制备干粉发酵剂的方法。

本发明是通过以下技术方案实现的：

所述方法中，干酪乳杆菌(Lactobacillus casei)KL1，乳酸乳球菌乳亚种(Lactococcus lactis subsp.lactis)KS4，嗜热链球菌(Streptococcus thermophilus)Tx三株菌种，均分离筛选自吉林、呼和浩特市普通家庭的藏灵菇(又称开菲尔粒)，并已于2006年9月11日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，其保藏号分别为：CGMCCNo.1809(菌株KL1)，CGMCCNo.1807(菌株KS4)和CGMCCNo.1810(菌株Tx)。