[发明专利]一株产苯乳酸的菌株及该菌发酵法制备苯乳酸的方法

权利要求书

1.一株产苯乳酸的片球菌属乳酸菌，其分类命名为戊糖片球菌(Pediococcus pentosaceus) SK25，已保藏于中国典型培养物保藏中心，保藏编号为CCTCC NO：M 2011360。

2.用权利要求1所述的CCTCC NO：M 2011360菌株发酵生产苯乳酸的方法，其特征在于以CCTCC NO：M 2011360作为出发菌种，以添加有苯丙氨酸、或苯丙酮酸的MRS培养基为发酵液，发酵法生物转化制备苯乳酸；工艺为：

（1）菌种：CCTCC NO：M 2011360；

（2）培养基，以g/L计：

保藏培养基：葡萄糖 20，酵母膏 5，蛋白胨 10，牛肉膏 10，磷酸氢二钾 2，无水乙酸钠 5，柠檬酸二铵 2，硫酸镁 0.58，硫酸锰 0.25，吐温-80 1mL/L，pH 6.2-6.4；2%琼脂粉，以自来水配制；

种子培养基：葡萄糖 20，酵母膏 5，蛋白胨 10，牛肉膏 10，磷酸氢二钾 2，无水乙酸钠 5，柠檬酸二铵 2，硫酸镁 0.58，硫酸锰 0.25，吐温-80 1mL/L，pH 6.2-6.4，以自来水配制；

发酵培养基：葡萄糖 20，酵母膏 5，蛋白胨 10，牛肉膏 10，磷酸氢二钾 2，无水乙酸钠 5，柠檬酸二铵 2，硫酸镁 0.58，硫酸锰 0.25，吐温-80 1mL/L，苯丙氨酸或苯丙酮酸1-10 mmol/L，pH 6.2-6.4，以自来水配制；

（3）制备工艺： 

菌种保藏：将CCTCC NO：M 2011360保藏在保藏培养基上，4℃ 保存，两周转接一次；或在活化菌种对数期时按照保藏培养基:甘油质量比为1:1将其保藏在-80℃超低温冰箱中；

种子培养：将CCTCC NO：M 2011360从保藏培养基接种至种子培养基需活化2代，每次30℃静止培养12 h，即总共24h；

发酵培养：将种子培养后的种子液按发酵液质量2%接入发酵培养基中，30℃静止培养36h；

发酵液后处理：通过低温离心法和0.22μm微滤法除去发酵液中的菌体，即得产品苯乳酸。

3.根据权利要求2所述的发酵生产苯乳酸的方法，其特征在于发酵液中添加苯丙酮酸或苯丙氨酸的最终浓度为5-6mmol/L。