[发明专利]用重组细胞合成长链多不饱和脂肪酸

权利要求书

1.产生含有二十碳五烯酸、二十二碳五烯酸和二十二碳六烯酸的油的方法，其步骤包括：获得油籽植物的种子，所述种子包含作为甘油三酯的一部分的酯化形式的二十碳五烯酸、二十二碳五烯酸和二十二碳六烯酸，其中所述种子的总脂肪酸包含至少2.5％的ω3C20脂肪酸(w/w)，且其中二十二碳五烯酸的水平基于二十碳五烯酸向二十二碳五烯酸的转化率为至少5％(w/w)，以及从所述种子提取油以便产生所述油。

2.产生含有二十碳五烯酸和二十二碳五烯酸的油的方法，其步骤包括：获得芸苔属或拟南芥属植物的种子，所述种子包含二十碳五烯酸和二十二碳五烯酸，其中所述种子的总脂肪酸包含至少2.5％的ω3C20脂肪酸(w/w)，且其中二十二碳五烯酸的水平基于二十碳五烯酸向二十二碳五烯酸的转化率为至少5％(w/w)，以及从所述芸苔属或拟南芥属植物的种子提取油以便产生所述油。

3.产生含有二十碳五烯酸、二十二碳六烯酸和二十二碳五烯酸的油的方法，其步骤包括：获得油籽油菜种子、棉花种子或亚麻种子，所述种子包含二十碳五烯酸、二十二碳六烯酸和二十二碳五烯酸，其中所述种子中的至少25％(w/w)的所述二十碳五烯酸、二十二碳六烯酸和二十二碳五烯酸整合于种子中的三酰甘油中，且其中所述种子的油中的总脂肪酸包含至少2.5％的ω3C20脂肪酸(w/w)，以及从所述种子提取油以便产生所述油。

4.权利要求1-3任一项的方法，其中所述提取油的步骤包括压榨所述种子。

5.权利要求1-3任一项的方法，其中所述种子的总脂肪酸包含至少9％的C20脂肪酸(w/w)。

6.权利要求1-3任一项的方法，其中所述种子的总脂肪酸包含至少1.5％的二十碳五烯酸和至少0.13％的二十二碳五烯酸(w/w)。

7.权利要求1-3任一项的方法，其中所述种子的总脂肪酸包含至少2.1％的二十碳五烯酸和低于0.1％的二十碳三烯酸(w/w)。

8.权利要求1-3任一项的方法，其中所述种子中的至少25％(w/w)的所述二十碳五烯酸和二十二碳五烯酸整合于种子中的三酰甘油中。

9.权利要求1-3任一项的方法，其中所述种子中的至少50％(w/w)的所述二十碳五烯酸和二十二碳五烯酸整合于种子中的三酰甘油中。

10.权利要求1-3任一项的方法，其中所述油包含至少50％的三酰甘油。

11.权利要求1-3任一项的方法，其中所述种子的总脂肪酸包含至少7.9％的C20脂肪酸(w/w)。

12.权利要求1-3任一项的方法，其中二十二碳五烯酸的水平基于二十碳五烯酸向二十二碳五烯酸的转化率为至少7％(w/w)。

13.权利要求12的方法，其中二十二碳五烯酸的水平基于二十碳五烯酸向二十二碳五烯酸的转化率为至少10％(w/w)。

14.权利要求12的方法，其中所述种子的总脂肪酸包含至少1.5％的二十碳五烯酸和至少0.13％的二十二碳五烯酸(w/w)。

15.权利要求12的方法，其中所述种子中的至少50％(w/w)的所述二十碳五烯酸和二十二碳五烯酸整合于种子中的三酰甘油中。

16.权利要求1的方法，其中所述种子是棉花种子。

17.权利要求1的方法，其中所述种子是亚麻种子。

18.权利要求1的方法，其中所述种子是油籽油菜种子。

19.一种酵母细胞，其包含：

作为所述酵母细胞中的三酰甘油的一部分的酯化形式的二十二碳五烯酸和二十二碳六烯酸；

编码Δ5延长酶的多核苷酸，其可操纵地连接于在酵母细胞中指导所述多核苷酸表达的启动子；

编码Δ4去饱和酶的多核苷酸，其可操纵地连接于在酵母细胞中指导所述多核苷酸表达的启动子；

编码去饱和酶的外源性多核苷酸，所述去饱和酶使酵母细胞中的酰基辅酶A底物去饱和；且

所述酵母细胞中的总脂肪酸含量中包括至少2.5％(w/w)的C20ω3长链多不饱和脂肪酸(LC-PUFA)和至少0.1％(w/w)的二十二碳五烯酸。