[发明专利]黏附特异性多肽序列聚己内酯多元醇-磷酸三钙支架

权利要求书

1.黏附特异性多肽序列聚己内酯多元醇-磷酸三钙支架，其特征在于，结合不同特定细胞粘附胶原多肽序列（精氨酸-甘氨酸-天冬氨酸 Arg—Gly—Asp RGD序列、天冬氨酸-甘氨酸-谷氨酸-丙氨酸 Asp—Gly—GIu—Ala DGEA 序列）修饰PCL－TCP支架，将多肽分子以交联方式固定于PCL－TCP支架表面，交联比例为比例为 0.2毫克多肽/每平方毫米表面积支架。

2.黏附特异性多肽序列聚己内酯多元醇-磷酸三钙支架的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：

第一步：PCL－TCP支架活化：PCL－TCP支架用10% (w/w) 1,6-hexanediamine/ isopropanol (DEA/IPA己二胺/异丙醇)溶液处理，常温25℃时间30分钟到90分钟，完成后用0.3%Tween 20（吐温20）和去离子水充分洗涤，干燥；

第二步：0.1M多肽（精氨酸-甘氨酸天冬氨酸 Arg—Gly—Asp RGD序列及天冬氨酸-甘氨酸-谷氨酸-丙氨酸 Asp—Gly—GIu—Ala DGEA 序列）, EDC （1-乙基-(3-二甲基氨基丙基)碳酰二亚胺盐酸盐）, N-hydroxysuccinimide (NHS,N-羟基琥珀酰亚胺)分别配制于2-(N-morpholino)-ethanesulfonic acid (MES，2-(N-吗啉)乙磺酸) 缓冲液 (pH of 5.5)中；

第三步：精氨酸-甘氨酸-天冬氨酸（Arg—Gly—Asp RGD）序列及天冬氨酸-甘氨酸-谷氨酸-丙氨酸 （Asp—Gly—GIu—Ala DGEA） 序列溶液首先和EDC 溶液以 1:1 摩尔比混合；

第四步：相当于25%EDC摩尔量的NHS 溶液加入到混合液，使得最终溶液中多肽：EDC：NHS摩尔比=4:4:1；

第五步：将已活化的PCL－TCP支架置于多肽、EDC、NHS溶液中，比例为 0.2毫克多肽对每平方毫米表面积支架；常温下处理时间3小时左右；

第六步：完成后用磷酸缓冲液冲洗，干燥即形成支架。