[发明专利]一种将液态漆酶制备成高浓度高纯度固态漆酶的方法

权利要求书

1.一种将液态漆酶制备成高浓度高纯度固态漆酶的方法，其特点是以2010年9月15日保存于中国典型培养物保藏中心的保藏编号为：CCTCC M 2010235的Pycnoporus sp.SYBC-L3高产漆酶的密孔菌属菌株为生产出发菌株，将各种不同成分的培养基和各种方法生产的液态漆酶粗酶液制备成高浓度固态漆酶，其中包括：

(1)以豆粕或硝酸钠为氮源，以麦芽糖或葡萄糖或果糖或纤维二糖等为碳源发酵生产制备的液态漆酶。

(2)以马铃薯为主要原料发酵高产制备的液态漆酶。

(3)以水稻秸秆为原料固态发酵制备的液态漆酶。

2.一种将液态漆酶制备成高浓度高纯度固态漆酶的方法，使用的主要设备是超滤机——选用分子量为1万-10万规格的超滤膜和喷雾干燥机——进风温度150℃至200℃、出风温度70℃至90℃，将液态漆酶制备成高浓度高纯度固态漆酶，其工艺、条件和作用为：

(1)先将发酵生产制备出的漆酶发酵液，用抽滤或压滤或离心的方法，除去菌体、较大的悬浮物和颗粒，得到漆酶粗酶液，由于菌体是药用真菌，蛋白质含量高且产漆酶，故收集的菌体起码可作饲料或生物肥料。

(2)将除去菌体、较大的悬浮物和颗粒的粗酶液，直接用喷雾干燥设备按进风温度150℃至200℃、出风温度70℃至90℃的条件喷雾干燥成固态漆酶，固态漆酶的每克酶活是发酵粗酶液每毫升酶活的50倍以上，液态发酵粗酶液体积和重量是固态漆酶体积和重量的100倍以上。

(3)用超滤设备——选用分子量为1万-10万规格的超滤膜将除去菌体、较大的悬浮物和颗粒的粗酶液超滤纯化并浓缩5-20倍，具体为：先选用1万分子量的超滤膜，超滤除去分子量在1万以下的小分子物质，然后用10万分子量的超滤膜，超滤收集分子量在1-10万的液体，因为我们制备的漆酶的分子量约为5.8万，得到纯化并浓缩了5-20酶液。

(4)用喷雾干燥机设备，选用进风温度150℃-200℃、出风温度70℃-90℃的条件将经超滤纯化浓缩了5-20倍的漆酶液喷雾干燥制备成高浓度高纯度固态漆酶，固态漆酶的每克酶活是发酵粗酶液每毫升酶活的250倍以上，液态发酵粗酶液体积和重量是固态漆酶的体积和重量的800倍以上。

3.在选择超滤设备和喷雾干燥机设备的使用条件时，要按下列原则：

(1)超滤设备具体选用何种规格和分子量的超滤膜对粗酶液进行浓缩和纯化，需根据发酵制备的漆酶的分子量大小和对纯度的要求来决定，因为漆酶的分子量从几万到几十万不等。

(2)喷雾干燥机设备具体选用进风温度和出风温度时，需根据液态酶液所含物质的浓度和酶对温度的耐热性来决定，一般来说：酶耐热性好，进风温度可高些；进风温度与出风温度温差越大、液态酶液所含物质的浓度越大，则干燥成固态酶的速度越快。