[发明专利]一种乙型肝炎病毒基因分型PCR检测试剂盒

权利要求书

1.一种乙型肝炎病毒基因分型PCR检测试剂盒，其特征在于，所述试剂盒包括B/C型PCR反应液和D型PCR反应液；

所述B/C型PCR反应液包括：

特异性扩增乙型肝炎病毒B和C型基因片段的引物Y1，所述Y1碱基序列如SEQ ID NO：1所示；

特异性扩增乙型肝炎病毒B和C型基因片段的的引物Y2，所述Y2碱基序列如SEQ ID NO：2所示；

用于检测乙型肝炎病毒B型基因片段的探针Y5，所述Y5碱基序列如SEQ ID NO：5所示；

用于检测乙型肝炎病毒B型基因片段的探针Y6，所述Y6碱基序列如SEQ ID NO：6所示；

用于检测乙型肝炎病毒C型基因片段的探针Y7，所述Y7碱基序列如SEQ ID NO：7所示；

用于检测乙型肝炎病毒C型基因片段的探针Y8，所述Y8碱基序列如SEQ ID NO：8所示；

所述D型PCR反应液包括：

特异性扩增乙型肝炎病毒D型基因片段的的引物Y3，所述Y3碱基序列如SEQ ID NO：3所示；

特异性扩增乙型肝炎病毒D型基因片段的的引物Y4，所述Y4碱基序列如SEQ ID NO：4所示；

用于检测乙型肝炎病毒D型基因片段的探针Y9，所述Y9碱基序列如SEQ ID NO：9所示；

所述探针5’端用荧光染料标记，3’端用淬灭荧光染料标记。

2.根据权利要求1所述的乙型肝炎病毒基因分型PCR检测试剂盒，其特征在于，所述荧光染料选自FAM、JOE或HEX，所述淬灭荧光染料选自BHQ、Eclipse或TAMRA。

3.根据权利要求1所述的基因分型PCR检测试剂盒，其特征在于，探针Y5、Y6和Y9的5’端用FAM标记，3’端用TAMRA标记；探针Y7和Y8的5’端用HEX标记，3’端用TAMRA标记。

4.按权利要求1所述的乙型肝炎病毒基因分型PCR检测试剂盒，其特征在于，所述引物的浓度为10μM，所述探针的浓度为10μM。

5.按权利要求1所述的乙型肝炎病毒基因分型PCR检测试剂盒，其特征在于，所述B/C型PCR反应液还包括纯水、10×PCR buffer、25mMMgCl₂，20mM dNTP、Taq酶和UNG酶，所述dNTP包括dATP、dUTP、dGTP和dCTP。

6.按权利要求1所述的乙型肝炎病毒基因分型PCR检测试剂盒，其特征在于，所述试剂盒包括DNA提取液、阳性参考品、阴性参考品、精密度参考品和灵敏度参考品。