[发明专利]腹泻性贝类毒素标准样品及其制备方法和应用

说明书

技术领域

本发明属于生物技术领域，涉及一种贝类毒素标准样品及其制备方法和应用，具体地说，涉及一种腹泻性贝类毒素标准样品及其制备方法和应用。

背景技术

贝类毒素属海洋天然有机物，它的形成与海洋中有毒藻类赤潮密切相关。据文献报道，能形成赤潮的微藻约有184～267种，其中有毒微藻约为60～78种。有毒藻类产生的毒素往往通过食物链进入贝类体内，因而通常称这些毒素为贝毒，人们食用带有贝毒的贝类造成中毒。贝类毒素的种类很多，目前发现的主要有麻痹性贝类毒素、腹泻性贝类毒素(diarrhetic shellfish poisons，DSP)、神经性贝类毒素(NSP)和记忆缺失性贝类毒素(ASP)四大类。

腹泻性贝类毒素(DSP)是海洋中藻类或微生物产生的一类脂溶性次生代谢产物，在贝体内性质非常稳定，一般的烹调加热不能使其破坏。人类误食会产生以腹泻为主要特征的中毒症状，严重者可出现黄疸、急性萎缩性肝坏死。被DSP毒化的贝类与当地海洋污染有关，与赤潮关系密切。可被DSP毒化的贝类是双壳贝类，主要是扇贝、贻贝、杂色蛤、文蛤、牡蛎等，不论什么贝类，DSP一般均局限在中肠腺。近年来，由DSP所引起的食物中毒事件在世界各地不断有报道，DSP在海洋生物毒素中，尤其是在贝类毒素中占据重要地位，已成为影响贝类养殖业和食品卫生的一个严重问题。

近年来贝类毒素已成为一个重要的公共卫生问题，已有多个国家对食品中贝毒限量进行控制，WHO也发布了关于预防贝毒危害、保护公共卫生的草案。我国是海洋经济贝类生产和出口大国，年产贝类约1100万吨，占世界总量70％。近10多年来，由于工业污染等原因导致我国近海赤潮频发，严重影响了海洋水产养殖发展和出口贸易。欧盟自1995年发生食用中国进口贝类中毒事件以后，对我国的贝类进口已采取无限期闭关；韩国、日本、美国等国也对我国进口贝类及相关产品制定了严格的限制措施。贝类毒素已成为妨碍我国沿海渔业经济发展的一大公害，贝类食品的安全是重大公共卫生问题，是制约我国海洋渔业经济发展的一个重要因素。

目前，人们对赤潮及贝类毒素还无法进行有效的控制，因此预防和预报是减轻其危害的有效手段。WHO推荐的最有效的预防方法是对水源或收获区域开展控制监测程序。在贝类生产的各个环节，随时监测贝类毒素的变化是至关重要的。已经建立了很多检测DSP的方法，如生物检测法、免疫分析法、细胞毒性检测法及化学分析法等，但每一种方法都必须使用标准样品或质控样品来作质控和定量。贝类毒素标准样品很难获得，一则因其为剧毒物质，世界各国对贝类毒素的出入境有严格的控制管理规定；另外贝类毒素种类繁多，极不稳定，很难保存。这势必极大限制了对贝毒有效监测，从而会给贝类养殖企业造成无法弥补的损失。我国对于具有溯源、有证、实物标样的腹泻性贝类毒素标准样品或质量控制样品制备技术是个空白，尚未见有关腹泻性贝类毒素标准样品的研制报道。研制腹泻性贝类毒素实物标准样品可以满足对贝类毒素标准样品不断日益扩大的市场需求，解决国内外贝类产品检测实验室的严重缺乏贝类毒素标准样品的需求，对提高食品安全检测技术、解决技术壁垒、保障食品安全起到重大的作用，同时也提高我国在国际上的影响力。

发明内容

本发明的一个目的在于提供一种腹泻性贝类毒素标准样品的制备方法。

本发明另一目的在于提供本方法制备的该腹泻性贝类毒素标准样品。

本发明的第三个目的在于提供该腹泻性贝类毒素标准样品的应用。

为了达到上述目的，本发明腹泻性贝类毒素标准样品的制备方法，包括以下步骤：

A)将贝类样品去杂质取中肠腺；

B)在所述中肠腺样品中加入蒸馏水，加入甲醇-丙酮-乙醚混合溶液，均质、混匀后得到匀浆液；

C)将所述匀浆液预冷后进行冷冻干燥得到粗样；

D)研磨所述粗样后过筛，得到贝类冻干粉；

E)向所述贝类冻干粉中加入蒸馏水，加入甲醇-丙酮-乙醚的混合溶液，混匀，预冷后再次进行冷冻干燥得到标准样品；

F)封装所述标准样品；

G)检验所述标准样品的均匀性和稳定性；

H)对所述标准样品的DSP含量进行定值；

其中，所述贝类样品包含DSP阳性或阴性的贝类样品。