[发明专利]一种检测亚硫酸氰根的方法

说明书

技术领域

本发明涉及亚硫酸氰根检测分析技术，具体属于一种基于香豆素衍生物定量检测亚硫酸氰根的方法。

背景技术

亚硫酸盐由于在产品生产和储存中能阻止氧化和细菌的生长以及控制酶的反应而成为许多食物、饮料和医药产品最基本的防腐剂。一定浓度的亚硫酸氰根能引起一些个体气喘和过敏。亚硫酸盐在食物和医药中的指标被严格控制。例如在中国，亚硫酸盐在葡萄酒中和啤酒中的指标不能超过0.05mg·kg^-1。就消费者的安全而言，发展亚硫酸盐的新的分析方法是非常重要的。目前官方采用的检测食物中亚硫酸氰根的方法是莫尼尔威廉姆斯法，此法乏味，耗时；另外还有一些常规的方法：磷光光度法、套色版、电化学、酶法等，然而这些方法要么需要繁琐的样品预处理、要么需要复杂的仪器设备。

发明内容

本发明的目的在于提供一种体系简单、操作方便、选择性高、灵敏度高、水溶性好的定量检测亚硫酸氰根的方法。

本发明采用的检测亚硫酸氰根的试剂是香豆素衍生物7-diethylaminocoumarin-3-aldehyde(DEACA)，参照文献(T.-K.Kim，D.-N.Lee，H.-J.Kim，Tetrahedron Lett.，2008，49，4879.)合成。合成路线为：

本发明提供的一种检测亚硫酸氰根的方法，包括如下步骤：

(1)、配制pH＝5.0、0.2M Na₂HPO₄-柠檬酸缓冲溶液，并用乙醇配制2mM的DEACA乙醇溶液；

(2)、按体积比400∶1将Na₂HPO₄-柠檬酸缓冲溶液和DEACA乙醇溶液加到干净的荧光比色皿中，在荧光光谱仪上检测，随着待测样的加入，483nm出现明显的荧光增强，且随着亚硫酸氰根浓度的增大，荧光强度也增大；

(3)、用蒸馏水配制2mM的HSO₃^-溶液，把2mL的Na₂HPO₄-柠檬酸缓冲溶液和5μL的DEACA乙醇溶液加到荧光比色皿中，逐渐加入HSO₃^-溶液的体积为5、10、20、40、60、80、100、120、140、160、180、200uL，同时在荧光光谱仪上测定483nm的对应的荧光强度F为70、78、94、138、160、190、221、252、284、302、329、355，以HSO₃^-浓度为横坐标，以相对荧光强度F-F₀(F₀＝40)为纵坐标绘制图，得到亚硫酸氰根浓度的工作曲线；线性回归方程为：F-F₀＝24.19+1.51c(c＝10^-6 mol/L)；

(4)、测定样品溶液时将测得的荧光强度代入线性回归方程，即可求得亚硫酸氰根的浓度。

经实验证明，其它阴离子包括半胱氨酸(Cys)不干扰体系对亚硫酸氰根的测定。

与现有技术相比，本发明具有如下优点和效果：1、检测体系成本低廉，试剂由水杨醛衍生物为主要原料两步制得，原料便宜，反应条件简单，易于生产；2、本发明的检测方法，对亚硫酸氰根显示了高的灵敏性和选择性；3、检测过程简便、快速，检测结果准确；4、检测手段简单，只需要借荧光光谱仪。

附图说明：

图1实施例1DEACA的单晶衍射结构图。

图2实施例2DEACA与亚硫酸氰根作用的荧光发射图。

图3实施例3DEACA和各种阴离子作用的荧光发射图。

图4实施例4DEACA和各种阴离子作用的荧光柱状图及颜色对照图。

图5实施例5工作曲线图。

图6实施例6糖中亚硫酸氰根含量测定图。

具体实施方式：

实施例1

DEACA的合成：将0.01mol的乙二胺水杨醛，0.02mol的丙二酸二乙酯，1mL哌啶溶解在30mL的乙醇中，回流搅拌6小时，蒸掉乙醇，把浓盐酸和冰醋酸各20mL加入此体系再搅拌6小时，加入100mL冰水，用40％的NaOH溶液调pH为5，再搅拌30分钟，混合物过滤，水洗，干燥，用苯重结晶得到7-diethylaminocoumarin。