[发明专利]一株产蔗糖果糖转移酶的菌株及用该酶生产菊糖的方法

权利要求书

1.一株产蔗糖果糖转移酶的菌株，其分类命名为蜡状芽孢杆菌（Bacillus cereus）SK21.001，已保藏于中国典型培养物保藏中心，保藏编号为CCTCC NO：M 2011462。

2.用权利要求1所述的CCTCC NO：M 2011462菌株发酵生产蔗糖果糖转移酶的方法，其特征在于步骤为：

（1）种子培养

种子培养基：酵母膏1-10g/L，蛋白胨1-20g/L，葡萄糖1-40g/L，pH6.0-8.0，去离子水配制；

种子培养条件：CCTCC NO：M 2011462菌株于30-37℃、150-250rpm的振荡速度下在种子培养基中培养10-20h活化该菌株；

（2）发酵培养

发酵培养基：酵母膏1-20g/L，蛋白胨1-20g/L，蔗糖1-30g/L，pH6.0-8.0，去离子水配制；

发酵条件：接种量1%-10%，30-37℃、搅拌速度100-700rpm、空气流量0.1-1.0vvm的条件下在发酵培养基中发酵10-48h生产蔗糖果糖转移酶；

（3）发酵后处理

发酵液经冷冻离心后收集上清液即为粗酶液，经检测酶活达到1-25U/mL；

所得粗酶液进一步超滤浓缩，或用硫酸铵沉淀蛋白质，离心和冷冻干燥得到蔗糖果糖转移酶的粗酶粉。

3.用权利要求2所述方法制备的蔗糖果糖转移酶转化蔗糖生产菊糖的方法，其特征在于：

向底物蔗糖溶液中添加蔗糖果糖转移酶进行催化转化生产菊糖，转化条件为：蔗糖溶液的蔗糖质量浓度为10%-50%，蔗糖果糖转移酶添加量0.5-50U/g蔗糖，pH4.0-8.0，转化反应温度为40-60℃，转化反应时间24-72h，转化率达10%以上，得到含有菊糖的酶反应液，进一步加工处理用来制备菊糖糖浆或菊糖粉末。

4.根据权利要求3所述的方法，其特征在于菊糖糖浆的制备方法，步骤为：

（1）脱色

在含有菊糖的酶反应液中添加0.2%-2.0%的活性炭，在50-80℃下温育10-60min，然后进行硅藻土过滤，取脱色液；

（2）浓缩

将脱色液真空蒸发浓缩至固形物质量含量为10%-70%，即得菊糖糖浆。

5.根据权利要求3所述的方法，其特征在于菊糖粉末的制备方法，步骤为：

（1）脱色

同菊糖糖浆的制备所述脱色步骤；

（2）浓缩

将脱色液真空蒸发浓缩至固形物质量含量为10%-70%的浓缩液；

（3）喷雾干燥

控制进风温度150-200℃、出风温度50-100℃，将菊糖浓缩液喷雾干燥，得到菊糖粉末。