[发明专利]小金海棠MxHA5蛋白及其编码基因与应用

权利要求书

1.一种蛋白质，是如下(a)或(b)：

(a)由序列表中序列1所示的氨基酸序列组成的蛋白质；

(b)将序列表中序列1的氨基酸残基序列经过一个或几个氨基酸残基的取代和/或缺失和/或添加且与植物中P型H⁺-ATPase酶活性相关的由(a)衍生的蛋白质。

2.编码权利要求1所述蛋白的基因。

3.根据权利要求2所述的基因，其特征在于：所述基因为如下1)-4)中任一所述的DNA分子：

1)序列表中序列2自5’末端第1至2862位核苷酸所示的DNA分子；

2)序列表中序列2所示的DNA分子；

3)在严格条件下与1)或2)所示的DNA分子杂交且编码所述蛋白的DNA分子；

4)与1)或2)或3)的基因具有90％以上的同源性且编码所述蛋白的DNA分子。

4.含有权利要求2或3所述基因的表达盒、重组表达载体、转基因细胞系或重组菌。

5.根据权利要求4所述的重组表达载体，其特征在于：所述重组表达载体是如下(I)或(II)：

(I)在pEZS-NL载体的多克隆位点间插入权利要求2或3所述基因得到的重组表达载体；

(II)在pYES2.0质粒的多克隆位点间插入权利要求2或3所述基因得到的重组表达载体。

6.根据权利要求4所述的重组菌，其特征在于：所述重组菌为将权利要求5的(II)所述重组表达载体导入酵母中得到的重组菌。

7.一种获得转基因生物的方法，为如下①或②或③：

①将权利要求2或3所述基因导入出发生物中，得到P型H⁺-ATPase酶活性增加的转基因生物；

②将权利要求2或3所述基因导入出发生物中，得到对金属离子胁迫的耐逆性增加的转基因生物；

③将权利要求2或3所述基因导入出发生物中，得到对金属离子缺乏的耐逆性增加的转基因生物。

8.根据权利要求7所述的方法，其特征在于：所述生物为酵母，权利要求2或3所述基因通过权利要求5的(II)所述重组表达载体导入所述出发生物。

9.权利要求1所述蛋白，或权利要求2或3所述基因在培育转基因生物中的应用；所述转基因生物的P型H⁺-ATPase酶活性和/或对金属离子胁迫的耐逆性和/或对金属离子缺乏的耐逆性高于出发生物。