[发明专利]一种功能化离子液体修饰的脂肪酶及其修饰方法有效
| 申请号： | 201210013025.6 | 申请日： | 2012-01-16 |
| 公开（公告）号： | CN102559635A | 公开（公告）日： | 2012-07-11 |
| 发明（设计）人： | 胡燚;黄和;贾儒 | 申请（专利权）人： | 南京工业大学 |
| 主分类号： | C12N9/20 | 分类号： | C12N9/20 |
| 代理公司： | 南京天华专利代理有限责任公司 32218 | 代理人： | 徐冬涛 |
| 地址： | 210009 *** | 国省代码： | 江苏;32 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 功能 离子 液体 修饰 脂肪酶 及其 方法 | ||
1.一种功能化离子液体修饰的脂肪酶，其特征在于所述的功能化离子液体修饰的脂肪酶是通过如下任意一种方法使功能化离子液体的有机官能团与脂肪酶的氨基酸残基通过共价结合得到的：
方法I：将含羧基的功能化离子液体、N-羟基琥珀酰亚胺与1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳二亚胺盐酸盐按1∶1∶1-3的摩尔比溶于吗啉乙磺酸，在25～35℃条件下反应1-2h进行活化，将活化后的功能化离子液体与脂肪酶按摩尔比200-1000∶1在0-4℃混合反应2-8h；
方法II：将含氨基的功能化离子液体、N-羟基琥珀酰亚胺、1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳二亚胺盐酸盐与脂肪酶按摩尔比100-300∶1∶1-3∶1溶于吗啉乙磺酸，在0-4℃混合反应3-10h。
2.根据权利要求1所述的功能化离子液体修饰的脂肪酶，其特征在于所述的功能化离子液体的阴离子是具有不同亲水性或电负性的极性离子，阳离子是含不同有机官能团的咪唑类离子，有机官能团为羧基或氨基。
3.根据权利要求2所述的功能化离子液体修饰的脂肪酶，其特征在于所述的功能化离子液体选自1-甲基-3-羧乙基咪唑氯盐、1-乙基-3-羧乙基咪唑氯盐、氯化1-甲基-3-(3-氨基丙基)咪唑、1-甲基-3-羧乙基咪唑六氟磷酸盐、溴化1-甲基-3-(3-氨基丙基)咪唑或1-丁基-3-羧乙基咪唑四氟硼酸盐。
4.根据权利要求1所述的功能化离子液体修饰的脂肪酶，其特征在于所述的脂肪酶为猪胰脂肪酶、根霉脂肪酶、洋葱假单胞菌脂肪酶、褶皱假丝酵母脂肪酶、南极假丝酵母脂肪酶或洋葱布克氏菌脂肪酶。
5.一种功能化离子液体修饰脂肪酶的方法，其特征在于通过如下任意一种方法使功能化离子液体的有机官能团与脂肪酶的氨基酸残基通过共价结合：
方法I：将含羧基的功能化离子液体、N-羟基琥珀酰亚胺与1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳二亚胺盐酸盐按1∶1∶1-3的摩尔比溶于吗啉乙磺酸，在25～35℃条件下反应1-2h进行活化，将活化后的功能化离子液体与脂肪酶按摩尔比200-1000∶1在0-4℃混合反应2-8h；
方法II：将含氨基的功能化离子液体、N-羟基琥珀酰亚胺、1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳二亚胺盐酸盐与脂肪酶按摩尔比100-300∶1∶1-3∶1溶于吗啉乙磺酸，在0-4℃混合反应3-10h。
6.根据权利要求5所述的功能化离子液体修饰脂肪酶的方法，其特征在于所述的功能化离子液体的阴离子是具有不同亲水性或电负性的极性离子，阳离子是含不同有机官能团的咪唑类离子，有机官能团为羧基或氨基。
7.根据权利要求6所述的功能化离子液体修饰脂肪酶的方法，其特征在于所述的功能化离子液体选自1-甲基-3-羧乙基咪唑氯盐、1-乙基-3-羧乙基咪唑氯盐、氯化1-甲基-3-(3-氨基丙基)咪唑、1-甲基-3-羧乙基咪唑六氟磷酸盐、溴化1-甲基-3-(3-氨基丙基)咪唑或1-丁基-3-羧乙基咪唑四氟硼酸盐。
8.根据权利要求5所述的功能化离子液体修饰脂肪酶的方法，其特征在于所述的脂肪酶为猪胰脂肪酶、根霉脂肪酶、洋葱假单胞菌脂肪酶、褶皱假丝酵母脂肪酶、南极假丝酵母脂肪酶或洋葱布克氏菌脂肪酶。
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