[发明专利]提取蛹虫草中虫草素和虫草多糖的方法

说明书

技术领域

 本发明涉及一种提取蛹虫草中虫草素和虫草多糖的方法。

背景技术

虫草素是蛹虫草中主要的活性成份，具有抗肿瘤、抗菌抗病毒、免疫调节、清除自由基等多种药理作用。虫草多糖是由甘露糖、虫草素、腺苷、半乳糖、阿拉伯糖、木糖精、葡萄糖、岩藻糖组成的多聚糖。虫草多糖也具有提高人体免疫功能，升高白细胞的作用，用于治疗恶性肿瘤和肺结核等多种病症，此外，虫草多糖还能抗心律失常，抗心肌缺血，扩张外周血管，降压、降血脂的功效。由于人工栽培的北冬虫夏草即蛹虫草中含有较多量的虫草多糖和虫草素，在蛹虫草中提取虫草素和虫草多糖已被公众认同。

然而，由于虫草多糖是一种极性大分子化合物，大多数虫草多糖不溶于冷水，在热水中呈粘液状，遇乙醇能沉淀，而虫草素相对而言易溶于水，所以，从蛹虫草中同时提取虫草素和虫草多糖有一定困难。如中国专利101200481A号公开的名称为“人工蛹虫草培养基中虫草素提取工艺”给出采用脱脂、调节等电点、除色素和柱洗脱四个步骤单纯提取虫草素，而没有给出同时提取虫草多糖的工艺步骤，且脱脂分别采用石油醚和乙醇浸泡后过滤得到不溶物，再向不溶物中滴加氯化氢得到滤液，在滤液中加入活性碳，并用超声波振荡后过滤所得滤液再经柱洗脱，洗脱液冷却后析出虫草素。该种提取方式虽然能够提出虫草素，但由于不溶物中含有虫草多糖，用酸提取虫草素易破坏虫草多糖的立体结构及活性，致使剩余物中的虫草多糖减少，从而造成资源浪费。

中国专利1268648C号授权公告的名称为“一种虫草多糖的提取工艺”提出采用提取、脱蛋白、乙醇沉淀、脱水干燥的方式获取虫草多糖，其提取步骤中，向培养基中加入60℃的水以提取上清液，并利用氯仿与正丁醇的混合液脱蛋白，通过乙醇收集沉淀物，脱水干燥后即淡黄色虫草多糖。虽然该专利是以提取虫草多糖为目的，但由于虫草素在60℃以上就会有一部分挥发，而该专利在提取上清液时，将水加热到60℃以上，会有较多的虫草素挥发，造成资源的浪费。

发明内容

本发明的任务是提供一种利用调整加水量和温度的方式解决资源浪费及纯度不高等问题的提取蛹虫草中虫草素和虫草多糖的方法。

本发明所提出的提取蛹虫草中虫草素和虫草多糖的方法于包括以下步骤：水提：将蛹虫草培养基粉放入提取罐中，向提取罐中加入质量是虫草培养基粉质量12－18倍的水，在水温为55－58℃的环境下热回流提取，然后对提取液进行过滤后再减压浓缩；醇提：向减压浓缩的提取液中加入是其6－10倍的食用酒精，然后利用离心机分离出上清液和沉淀物；柱提上清液：首先对上清液进行浓缩，回收酒精，再将浓缩液加入到树脂柱内，并采用蒸馏水进行洗脱，将洗脱液收集后进行浓缩，对浓缩液喷雾干燥后即可获得虫草素；柱提沉淀物：首先对沉淀物放入容器中，然后依次用食用酒精、丙酮、乙醚对其进行清洗，再对清洗后的沉淀物进行干燥，再向经干燥过的沉淀物中加入8－12倍的水，加热溶解后去除其内的蛋白质，再进行一次浓缩，然后再加入2.5-3.5倍食用酒精进行醇沉，对醇沉后的沉淀依次用无水乙醇、丙酮、乙醚冲洗，将冲洗后的沉淀物进行干燥，所得干燥物即为虫草多糖。在水提步骤中，如果水的温度高于58℃，虫草素就易分解；如果水的温度低于55℃，不易使虫草素溶解。

　　所述水提步骤中，采用热回流的方式分三次提取，每次提取时间在1.5－3小时。所述柱提步骤中，对树脂处理时先采用水漂洗去除杂质，然后再用氢氧化钠溶液浸泡该树脂5-6小时用蒸馏水冲洗至中性。所述柱提步骤中，用氢氧化钠溶液浸泡该树脂5-6小时后，用蒸馏水冲洗至中性，然后用氯化氢溶液浸泡该树脂5-6小时后，用蒸馏水冲洗至中性。所述柱提沉淀物步骤中，采用热回流的方式分三次提取，每次提取时间在1.5－3小时。

本发明所提出的提取蛹虫草中虫草素和虫草多糖方法在水提步骤中，水的温度设置在55－58℃之间，即能让虫草中的活性成份尽量充分溶解，同时也可避免虫草素分解，所以，采用该种水温提取虫草素和虫草多糖不会造成资源浪费；同时，采用醇提的方式分离上清液和沉淀物可分别提取虫草素和虫草多糖，且加入6－10倍的食用酒精可以使上清液和沉淀物分离更彻底；另外，采用本方法提取的虫草素经过检测，在100g的虫草中能提取741.3mg的虫草素。

具体实施方式：

实施例1