[发明专利]次血红素的制备工艺

说明书

技术领域

本发明涉及一种对三价铁卟啉化合物进行合成及纯化的方法。

背景技术

次亚血红素(Deuterohemin)属于一种三价铁卟啉衍生物，化学名称为3，7，12，17-四甲基-21H，23H-卟吩-2，18-二丙酸氯化铁，分子式[C₃₀H₂₈FeN₄O₄]⁺Cl^-，分子量599.88道尔顿，结构式如下：

次亚血红素的制备通常是由血红素(Heme，Hame)上的乙烯基被还原而得到的。如利用间苯二酚对血红素的C-烷基化反应可以得到亚血红素(刘亚丽等，亚血红素的合成和纯化方法的改进，吉林大学自然科学学报，2001年1月，第91-92页)，在该文章中，亚血红素的纯化是采用硅胶柱层析技术，该方法工艺繁琐，收率低，仅有40％。

此外，专利200910151910.9采用的另一种纯化方法，即将次血红素粗品溶解于一种或多种第一溶剂中，向该溶液中加入一种或多种第二溶剂以产生沉淀，并收集沉淀物，将获得的沉淀物溶解于一种或多种第一溶剂中，并向该溶液中加入一种或多种第二溶剂以产生沉淀，再次收集沉淀物，该专利中所述的第一种溶剂选自稀碱、吡啶、二甲基甲酰胺、二甲基亚砜、N-甲基吡咯烷酮和它们的合适混合物，所述第二种溶剂选自稀酸、水、醚类、丙酮、六碳以下的醇类、酯类、卤代烃和它们的合适混合物。该纯化方法中，次血红素的收率最高可达95％，纯度为96.2％。

发明内容

本发明要解决的技术问题是：仅采用一种溶剂以及简单的两步重结晶方法，可以获得收率高、纯度高的次血红素，可适用于大规模的工业化生产。

本发明的具体技术方案如下。

一种次血红素的制备工艺，有以下步骤，

(1)将血红素与间苯二酚以1∶4的质量比混合，120～135℃油浴15～25分钟，升至150℃维持15～25分钟，195～200℃维持10～20分钟，冷却至90～100℃，倒入80～90℃水中，用水洗至上清无色，离心，弃上清，得到次血红素粗品；

(2)在次血红素粗品中加入二甲基甲酰胺溶剂搅匀，溶剂加入量按每100克血红素加入2升二甲基甲酰胺的比例计算，再加入浓度0.1mol/L的氢氧化钠溶液，氢氧化钠溶液加入量按每100克血红素加入10升氢氧化钠溶液的比例计算；用盐酸调pH至中性，有沉淀析出，静置，抽滤，弃上清，再水洗沉淀至上清近无色，抽滤，弃上清，得到沉淀；

(3)在沉淀中加入二甲基甲酰胺溶剂，重复步骤(2)；

即，在沉淀中再加入二甲基甲酰胺溶剂搅匀，溶剂加入量同步骤(2)，再加入浓度0.1mol/L的氢氧化钠溶液，氢氧化钠溶液加入量同步骤(2)；用盐酸调pH至中性，有沉淀析出，静置，抽滤，弃上清，再水洗沉淀至上清近无色，抽滤，弃上清，得到沉淀；

(4)将所得沉淀烘干，得到次血红素纯品。

在(1)步骤中，所述的离心，转速可以是8000～10000rpm，离心20～30分钟。

在(4)步骤中，所述的烘干，可以在120～140℃下进行。

本发明仅采用优选的二甲基甲酰胺溶剂，一种溶剂两步重结晶方法，过程简单，成本降低，而获得的次血红素收率更高(96％)、纯度更高(97以上)，因此适用于大规模的工业化生产。

具体实施方式

实施例1：

称取血红素500克，间苯二酚2000克，混合后置于三口瓶中，120℃油浴20分钟，升温至150℃维持20分钟，195℃维持15分钟，冷却至100℃置于搅拌器上，倒入90℃左右水中，用水洗至上清近无色，8000rpm离心20分钟，弃上清，沉淀加入10L二甲基甲酰胺，搅匀，再加入50L浓度0.1mol/L的氢氧化钠溶液，用盐酸调pH至中性，有沉淀析出，静置，抽滤，用水洗沉淀至上清近无色。所得沉淀再次加入10L二甲基甲酰胺，搅匀，再加入50L浓度0.1mol/L的氢氧化钠溶液，用盐酸调pH至中性，有沉淀析出，静置，抽滤，用水洗沉淀至上清近无色。将所得沉淀130℃烘干，称重得482克，高效液相色谱检测纯度。(检测波长：390nm；色谱柱：反相C18 25μm柱；流动相：乙腈∶0.1％三氟乙酸水溶液＝35∶65)。

收率：96.4％，

纯度：97.3％。

实施例2：