[发明专利]脂质体凝胶制剂及其制备方法和用途

说明书

技术领域

本发明主要涉及一种脂质体凝胶制剂，特别是丹皮酚免疫脂质体凝胶制剂。本发明还涉及该凝胶制剂的制备方法和用途。

背景技术

增生性瘢痕(Hypertrophic scars, HS)是一种渐进性、病理性并难以逆转的皮肤疾病，常发生在深度创伤(如手术、烧烫伤)修复过程中，由大量微细血管生成、成纤维细胞增殖、胶原过度沉积导致真皮过度纤维化引起。医学研究结果已表明，瘢痕增生的程度与创伤皮肤部位的微血管密度呈正相关，其中血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor, VEGF)在生理及病理血管再生中起关键性作用。发生组织创伤后，炎症、过敏反应、缺氧、内分泌紊乱等因素，导致胶原合成与降解之间的平衡被打破，角质形成细胞、成纤维细胞大量分泌VEGF等细胞因子，这些过量的细胞因子，与相应的受体结合后，产生免疫调控作用，形成无序的组织愈合反应，最终导致病理性结局。尤其是VEGF与相应受体结合后，促进内皮细胞分化增殖和迁移，刺激血浆纤维蛋白外渗并沉积在细胞外基质中，诱导大量的血管生成，这些新生血管输送氧气和营养物质、转运代谢产物，促进成纤维细胞合成过量的胶原纤维，是导致表皮生成异化的主导因素。

在增生性瘢痕的治疗方案中，目前临床常用手术切除和药物治疗手段。手术治疗通常需要进行植皮和放射线或激光照射辅助治疗，且平均复发率达50%以上。治疗药物主要有类固醇类激素(局部注射或涂抹)、抗代谢药物(局部注射或口服)和硅制剂(涂抹或喷雾)，其中激素类药物显效快，但长期应用会出现局部副作用和全身反应，如皮肤萎缩、局部毛细血管扩张及色素沉着等；抗代谢药物一般为抗癌制剂，毒副作用突出，影响正常皮肤组织细胞的代谢和活性；硅制剂无副作用且病人顺从性好，但只对保持压力的部位(如四肢)有效。

有鉴于此，有必要提供一种治疗增生性瘢痕的制剂，其既能够抑制血管过度增生及胶原纤维过快沉积，又不影响正常皮肤组织和细胞的代谢和活性；避免使用抗瘢痕增生药物引起的并发症等副作用，从而既能抑制新生血管、组织纤维过度增殖又降低甚至消除全身毒副反应。

发明内容

本发明的目的之一在于提供一种用于治疗增生性瘢痕的脂质体凝胶制剂，所述脂质体凝胶制剂包括脂质体、凝胶材料和甘油，所述脂质体包封有丹皮酚并且在表面通过聚乙二醇结合有血管内皮生长因子抗体。

在优选的实施方式中，所述血管内皮生长因子抗体为贝伐单抗，其连接在聚乙二醇长链的自由端。

在优选的实施方式中，所述贝伐单抗是通过贝伐单抗-聚乙二醇-二油酰磷脂酰乙醇胺而结合到脂质体表面的。

在优选的实施方式中，所述脂质体是由选自蛋黄卵磷脂、脑磷脂?肌醇磷脂、丝氨酸磷脂、核苷酸磷脂、大豆卵磷脂、二硬脂酰磷脂酰胆碱、二棕榈酰磷脂酰胆碱、二油酰磷脂酰胆碱、二棕榈酰磷脂酰乙醇胺、二硬脂酰磷脂酰甘油、氢化大豆卵磷脂、十六烷基磷脂酰胆碱中的一种或多种磷脂组成的。优选地，所述脂质体是由蛋黄卵磷脂和氢化大豆卵磷脂中的一种或两者的混合物组成的。通过实验发现，各种磷脂材料的相变温度不同，制备温度需高于相变温度。实验优选使用蛋黄卵磷脂、氢化大豆卵磷脂中的一种或两者的混合物。

在优选的实施方式中，所述凝胶材料选自泊洛沙姆188、泊洛沙姆407、卡波姆934和卡波姆980中的一种或多种。

在优选的实施方式中，所述脂质体的微粒的粒径为50至220 nm。

本发明另一方面提供一种用于治疗增生性瘢痕的脂质体凝胶制剂的制备方法，本发明人从有机溶剂注入法、冻融法、薄膜蒸发法、主动载药法等方法中进行筛选脂质体制备方法，发现其中有机溶剂注入法最为适宜工业化生产，且制成的脂质体溶液粒径适宜（50～220nm），包封率较高（>70％）。

本发明提供的方法包括以下步骤：(a)将丹皮酚用乙醇或乙醚溶解，加入磷脂材料、胆固醇、Avastin-PEG-DOPE，搅拌使各成分溶解，得到澄清透明溶液；(b) 通过具有细孔径的针头或管道以液流方式将步骤(a)得到的澄清透明溶液注入到pH调节剂水溶液中，同时搅拌；(c) 通入N₂以去除大部分有机溶剂；(d) 将步骤(c)所得溶液超声波粉碎或高压均质，得到脂质体溶液；和(e) 将高分子凝胶材料加入所述脂质体溶液中，溶胀完全后，加入甘油，研磨均匀即得。