[发明专利]凝胶电泳核酸标志物及其制备方法和应用有效
申请号: | 201210014985.4 | 申请日: | 2012-01-18 |
公开(公告)号: | CN102534012A | 公开(公告)日: | 2012-07-04 |
发明(设计)人: | 高丰厚;时婧;郭跃辉;姜斌 | 申请(专利权)人: | 上海交通大学医学院附属第三人民医院 |
主分类号: | C12Q1/68 | 分类号: | C12Q1/68;C12N15/11;C12N15/10 |
代理公司: | 上海新天专利代理有限公司 31213 | 代理人: | 王敏杰 |
地址: | 201900 *** | 国省代码: | 上海;31 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 凝胶电泳 核酸 标志 及其 制备 方法 应用 | ||
1.一种凝胶电泳核酸标志物,其特征在于,包括单链DNA,还包括DNA-DNA双链和/或DNA-RNA杂化双链;其中,DNA-DNA双链中的两个单链DNA碱基数相同,并且互补;DNA-RNA双链中的单链DNA和单链RNA碱基数相同,并且互补。
2.根据权利要求1所述的凝胶电泳核酸标志物,其特征在于,所述DNA-RNA杂化链中单链RNA为10nt~88nt的序列。
3.根据权利要求1所示的凝胶电泳核酸标志物,其特征在于,所述单链小DNA、DNA-DNA双链和DNA-RNA杂化链中单链DNA为10nt~88nt的序列。
4.根据权利要求2或3所述的凝胶电泳核酸标志物,其特征在于,所述单链DNA和/或单链RNA中,同一碱基数量连续不超过4个,A、G碱基占碱基总数的百分含量≤60%。
5.根据权利要求4所示的凝胶电泳核酸标志物,其特征在于,单链DNA和/或单链RNA的3′端标记非同位素。
6.一种应用权利要求1所述凝胶电泳核酸标志物进行凝胶电泳检测核酸的方法,其特征在于,步骤包括:
步骤1,核酸探针与待测核酸液相杂交;
步骤2,加入权利要求1所述分子对照物中的一种或多种进行凝胶电泳;
步骤3,确定待测核酸探针和目的核酸的杂交链在凝胶电泳迁移。
7.根据权利要求6所述的方法,其特征在于,所述待测核酸为≤200bp的核酸。
8.一种如权利要求1所述的凝胶电泳核酸标志物的制备方法,其特征在于,设计合成单链DNA、单链DNA互补系列和/或单链RNA;单链RNA、单链DNA、单链DNA互补序列液相杂交按照碱基互补配对原则形成RNA-DNA杂化双链和DNA-DNA双链。
9.根据权利要求8所述的凝胶电泳核酸标志物的制备方法,其特征在于,所述单链DNA或单链RNA中,同一碱基数量连续不超过4个,A、G碱基占碱基总数的百分含量≤60%。
10.根据权利要求8所述的凝胶电泳核酸标志物的制备方法,其特征在于,所述单链RNA为10nt~88nt的序列;所述单链DNA为10nt~88nt的序列。
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