[发明专利]凝胶电泳核酸标志物及其制备方法和应用有效

专利信息
申请号: 201210014985.4 申请日: 2012-01-18
公开(公告)号: CN102534012A 公开(公告)日: 2012-07-04
发明(设计)人: 高丰厚;时婧;郭跃辉;姜斌 申请(专利权)人: 上海交通大学医学院附属第三人民医院
主分类号: C12Q1/68 分类号: C12Q1/68;C12N15/11;C12N15/10
代理公司: 上海新天专利代理有限公司 31213 代理人: 王敏杰
地址: 201900 *** 国省代码: 上海;31
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摘要:
搜索关键词: 凝胶电泳 核酸 标志 及其 制备 方法 应用
【权利要求书】:

1.一种凝胶电泳核酸标志物,其特征在于,包括单链DNA,还包括DNA-DNA双链和/或DNA-RNA杂化双链;其中,DNA-DNA双链中的两个单链DNA碱基数相同,并且互补;DNA-RNA双链中的单链DNA和单链RNA碱基数相同,并且互补。

2.根据权利要求1所述的凝胶电泳核酸标志物,其特征在于,所述DNA-RNA杂化链中单链RNA为10nt~88nt的序列。

3.根据权利要求1所示的凝胶电泳核酸标志物,其特征在于,所述单链小DNA、DNA-DNA双链和DNA-RNA杂化链中单链DNA为10nt~88nt的序列。

4.根据权利要求2或3所述的凝胶电泳核酸标志物,其特征在于,所述单链DNA和/或单链RNA中,同一碱基数量连续不超过4个,A、G碱基占碱基总数的百分含量≤60%。

5.根据权利要求4所示的凝胶电泳核酸标志物,其特征在于,单链DNA和/或单链RNA的3′端标记非同位素。

6.一种应用权利要求1所述凝胶电泳核酸标志物进行凝胶电泳检测核酸的方法,其特征在于,步骤包括:

步骤1,核酸探针与待测核酸液相杂交;

步骤2,加入权利要求1所述分子对照物中的一种或多种进行凝胶电泳;

步骤3,确定待测核酸探针和目的核酸的杂交链在凝胶电泳迁移。

7.根据权利要求6所述的方法,其特征在于,所述待测核酸为≤200bp的核酸。

8.一种如权利要求1所述的凝胶电泳核酸标志物的制备方法,其特征在于,设计合成单链DNA、单链DNA互补系列和/或单链RNA;单链RNA、单链DNA、单链DNA互补序列液相杂交按照碱基互补配对原则形成RNA-DNA杂化双链和DNA-DNA双链。

9.根据权利要求8所述的凝胶电泳核酸标志物的制备方法,其特征在于,所述单链DNA或单链RNA中,同一碱基数量连续不超过4个,A、G碱基占碱基总数的百分含量≤60%。

10.根据权利要求8所述的凝胶电泳核酸标志物的制备方法,其特征在于,所述单链RNA为10nt~88nt的序列;所述单链DNA为10nt~88nt的序列。

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