[发明专利]Neuritin蛋白的HLA-A*0201限制性CTL表位及其应用

说明书

技术领域

本发明属于生物医药领域，涉及一种抗原细胞毒性T细胞（CTL）表位，特别涉及neuritin蛋白的HLA-A*0201限制性CTL表位，还涉及该CTL表位的应用。

背景技术

胶质瘤是中枢神经系统常见的颅内原发肿瘤，国内资料统计平均为40-50%。现已明确化疗能延长一些胶质瘤患者的生存期，但效果仍不理想。随着分子生物科学技术的迅速发展，肿瘤的分子水平及浸润、转移、生长增殖、血管发生等一些分子参与的发病机制的认识越来越多，肿瘤的分子治疗逐渐显示了日益重要的地位。

肿瘤特异性免疫治疗由于不伤及无关正常组织，是近年来发展迅速的肿瘤治疗方法。其基本原理是肿瘤抗原多肽在抗原提呈细胞（APC）的作用下以MHC-I-肽复合物（与MHC-I类分子结合的肽被定义为CTL表位）的形式被提呈于APC表面，CTL通过其T细胞受体特异识别APC表面的MHC-I-肽复合物而得以活化，最终特异识别存在于肿瘤细胞表面的抗原多肽而特异杀伤肿瘤细胞。因此，寻求特异肿瘤抗原及其相应的CTL表位是肿瘤特异性免疫治疗的关键。

neuritin是一种广谱表达的小分子蛋白，属于神经营养因子家族。neuritin编码的蛋白质能调节神经元突起的生长和成熟，促进神经突起的快速生长及分支，调节突触回路的形成和神经细胞再生和可塑性方面发挥重要作用。最新研究结果显示，在胶质瘤组织中，neuritin的表达量在正常以及癌旁组织中有显著性差异，提示它和胶质瘤的发生发展密切相关。并且有文献报道，转染neuritin的3T3细胞注射裸鼠体内可导致相应部位肿瘤的形成。研究结果提示neuritin参与了肿瘤的发生过程，促进肿瘤细胞的生长。因此，neuritin有可能在胶质瘤的免疫治疗中发挥重要的靶向作用。

由于HLA-A*0201是中国人群最为常见的HLA-I类分子的型别，阳性率高达50%，同时也是北美高加索人种最常见的HLA-I类分子的型别，阳性率高达98%。因此，鉴定出神经营养蛋白neuritin的HLA-A*0201限制性CTL表位，将会对中国人群和北美高加索人群中Neuritin表达异常升高的恶性肿瘤提供免疫治疗的基础。

发明内容

有鉴于此，本发明的目的之一在于提供neuritin蛋白的HLA-A*0201限制性CTL表位，该表位能够以高亲和力结合HLA-A*0201，所形成的复合物稳定，能够诱导肽特异性的CTL应答。

为达到上述目的，本发明提供如下技术方案： neuritin蛋白的HLA-A*0201限制性CTL表位，其氨基酸序列如SEQ ID No.1、SEQ ID No.2或SEQ ID No.3所示。

本发明的目的之二在于提供所述neuritin蛋白的HLA-A*0201限制性CTL表位在制备肿瘤治疗性肽疫苗中的应用。

进一步，所述肿瘤治疗性肽疫苗为神经胶质瘤治疗性肽疫苗。

本发明的有益效果在于：本发明提供了neuritin蛋白的HLA-A*0201限制性CTL表位，该CTL表位能够以高亲和力结合HLA-A*0201，所形成的复合物稳定，能够诱导肽特异性的CTL应答，刺激肽特异性CTL分泌高水平的IFN-γ并对肿瘤细胞产生特异性杀伤效应，可用于制备肿瘤治疗性肽疫苗例如神经胶质瘤治疗性肽疫苗，在肿瘤特异性免疫治疗领域有着潜在、良好的开发应用前景。

附图说明

图1为预测CTL表位P1与HLA-A*0201的复合物模型。

图2为预测CTL表位P2与HLA-A*0201的复合物模型。

图3为预测CTL表位P3与HLA-A*0201的复合物模型。

图4为预测CTL表位P1的分子动力学模拟构象。

图5为预测CTL表位P2的分子动力学模拟构象。

图6为预测CTL表位P3的分子动力学模拟构象。

图7为预测CTL表位肽P1、P2、P3与HLA-A*0201的亲和力检测结果。

图8为预测CTL表位肽P1、P2、P3与HLA-A*0201的复合物稳定性检测结果。

图9为预测CTL表位肽P1、P2、P3刺激肽特异性CTL杀伤靶细胞的能力检测结果。

图10为预测CTL表位肽P1、P2、P3刺激肽特异性CTL分泌IFN-γ的能力检测结果。

具体实施方式

为了使本发明的目的、技术方案和优点更加清楚，下面将结合附图对本发明作进一步的详细描述。