[发明专利]通过CLEC-6激活人抗原呈递细胞

说明书

本申请是申请日为2008年2月22日、申请号为200880013398.5、发明名称为“通过CLEC-6激活人抗原呈递细胞”的中国专利申请的分案申请。 

发明的技术领域 

一般而言，本发明涉及抗原呈递和免疫细胞激活领域，具体地，涉及通过CLEC-6C型凝集素激活免疫细胞。 

发明背景 

不限制本发明的范围，描述与树突细胞相关的发明背景。 

树突细胞通过提供可溶性细胞间信号继而病原菌识别而在控制先天性和获得性免疫的界面中起着关键作用。树突细胞的这些功能主要依赖于特定的表面受体，“模式识别受体(PRR)”，最为典型的例子是toll样受体(TLR)和C型凝集素或凝集素样受体(LLR)(1-3)。在目前的模式中，TLR的主要作用是提醒DC以产生白细胞介素12(IL-12)和其它炎症细胞因子以起始免疫应答。C-型LLR作为巨噬细胞和DC中强大的抗原捕获和摄取机制的组成部分发挥作用(1)。然而，与TLR相比，LLR可能具有更宽泛的生物功能，包括细胞迁移(4)、细胞间相互作用(5)。LLR的这些多重功能可以是由于不同于TLR，LLR能够识别自身和非自身的事实。然而，LLR的复杂性，包括免疫细胞中表达的众多LLR的冗余性，是对各个LLR的详细功能理解的主要障碍之一。此外，大多数这些受体的天然配体仍然没有被鉴定出来。虽然如此，最近研究的证据表明LLR与TLR协同在微生物感染过程中可以对激活免疫细胞起作用(6-14)。 

发明概述 

本发明包括利用抗人CLEC-6单克隆抗体(mAb)以及鉴定它们的生物功能的组合物和方法，其中这些生物功能是预期的抗CLEC-6mAb及其替代物的治疗应用的基础。本发明包括接触抗原呈递细胞，例如树突细胞(DC)，所述细胞表达CLEC-6并在与特定的DC激活相关的摄取抗原而导致改变的体液和细胞免疫应答中发挥作用。本发明的发明人开发并鉴定了特异的能够激 活具有CLEC-6的细胞的试剂(agent)，以及在接受这些信号的细胞中导致的变化对免疫系统中其它细胞的影响。这些影响(单独，或者与其它信号协同(即共激活))高度预测对特定疾病状态的治疗效果或者在接种免疫中增强的保护性效果。 

发现作为LLR成员之一的CLEC-6单独或与其它细胞信号协作在激活细胞(包括DC)方面发挥功能。CLEC-6介导的细胞激活受抗CLEC-6mAb的诱导，因而抗人CLEC-6mAb或其替代物在开发针对疾病的试剂中是有用的。 

本发明包括用于增加表达CLEC-6的抗原呈递细胞的抗原呈递效力的组合物和方法，通过使抗CLEC-6特异性抗体或其片段与抗原呈递细胞接触来进行，其中抗原呈递细胞被激活。所述抗原呈递细胞可以是分离的树突细胞、外周血单核细胞、单核细胞、髓样树突细胞及它们的组合。在一个具体实施方案中，抗原呈递细胞是已在体外与GM-CSF和IL-4、干扰素α、抗原及其组合一起培养的分离的树突细胞、外周血单核细胞、单核细胞、B细胞、髓样树突细胞及这些细胞的组合。所述方法还可包括用GM-CSF和IL-4激活抗原呈递细胞的步骤，其中与CLEC-6特异性抗体或其片段的接触增加抗原呈递细胞上的CD86和HLA-DR的表面表达。 

发现可以使用本发明用CLEC-6特异性抗体或片段激活抗原呈递细胞，以增加抗原呈递细胞上的CD86、CD80和HLA-DR的表面表达。如果抗原呈递细胞是树突细胞(CD)，用CLEC-6特异性抗体和GM-CSF和IL-4激活的DC具有图4的基因表达谱。用CLEC-6特异性抗体激活的抗原呈递细胞分泌IL-6、MIP-1a、MCP-1、IP-10、TNFa及其组合，而如果APC是树突细胞，则它们分泌IL-6、MIP-1a、MCP-1、IP-10、TNFa、IL-12p40、IL-1a、IL-1b及其组合。当激活已与GM-CSF和IL-4或干扰素α接触的树突细胞时，CLEC-6特异性抗体或其片段以及CD40配体进一步增强对树突细胞的激活。当与GM-CSF和IL-4或干扰素α以及CLEC-6特异性抗体或其片段接触时，DC增加其共刺激活性。