[发明专利]一种基于鼠尾胶原蛋白制备的可吸收止血材料及其制备方法

说明书

【技术领域】

本发明涉及一种基于鼠尾胶原蛋白制备的产品，可吸收止血材料及其制备方法。

【背景技术】

胶原蛋白是脊椎动物和无脊椎动物支持结构的主要组成。在人的身体中这是皮肤、筋、软骨、骨骼及结缔组织的最主要的蛋白质。胶原蛋白占人体蛋白质总量的三分之一，不论来源于哪一种动物或哪一种组织的胶原都有许多共同特性。氨基酸组成中约有三分之一为甘氨酸，有脯氨酸和羟脯氨酸。根据其遗传分子结构遗传基因的差别，胶原蛋白分为20几个亚型。但最为常见的为I、II、III型胶原蛋白，即间质胶原蛋白。其中I型最为丰富且品质优良。I型胶原蛋白分布非常广泛，是主纤维束的主要成分，给结缔组织以强度；是最丰富的胶原蛋白类型，尤其是在皮肤真皮、骨、筋和腱中。

I型胶原蛋白是由两条α1链和一条α2链组成。以共价键交联互相缠绕构成了螺旋形高分子，长约300nm，直径1.4-1.5nm，由约1050个氨基酸构成，分子量约300kD。由于其N端及C端的非胶原性肽(尾肽)部分桥键比较多，加上其螺旋形态结构，故刚性强、溶解度低，给I型胶原蛋白的提取带来一定难度。

一般的生物体中提取的胶原蛋白多为混合型，之前多从牛皮、猪皮、牛腱中提取，但这类胶原蛋白不仅有油脂等其他杂质，也存在着II型及其他一些胶原蛋白亚型；同时，这种畜牧业大量饲养的动物存在着例如疯牛病等一些生物性疾病及病毒感染，如果用此开发医用产品更加存在着品质的不稳定及潜在的风险及危害；再次，人的真皮中主要含有I型和III型，但III型不易大量获得，故应用单一的I型胶原蛋白是解决体外应用的医用产品引起的抗原性问题的关键，这也是I型胶原蛋白抗原性低的原因之一。同时，I型胶原蛋白的三重螺旋的氨基酸结构决定了它的一些特有的性能，如机械性能、促进细胞生长、弱抗原性、可生物降解性和胶原的自缔合性。因为I型胶原蛋白不仅对细胞起到锚定和支持的作用，还为细胞的生长提供适宜的微环境，积极参与了细胞迁移，分化与增殖等细胞行为，可完全被人体吸收，启动凝血因子，对胚胎发育和创伤修复有积极作用。

随着现代医学的发展，各种医用耗材的更新换代也是日新月异。止血材料是常见的医疗器械产品。但是现今市面上的止血材料不仅存在着容易引起伤口感染的缺点；同时还存在着容易与伤口粘附不易去除，导致伤口溃烂，或者因为粘附导致感染；再次就是止血材料多是通过吸收血液及添加凝血酶等外在因素止血，很少有止血材料是使用能够自身具有止血性质的材料来生产的。现今市面上的可吸收止血材料有氧化纤维素、α-氰基丙烯酸酯类组织胶、医用止血明胶等，但是都有各自的缺点。如氧化纤维素可引起组织周围pH值升高；α-氰基丙烯酸酯类组织胶降解过程中释放出氰和甲醛等有毒物质；医用止血明胶黏附性较差，易脱落，因其吸收血液后膨胀可能压迫伤口周围组织等。

迄今为止，还没有十分理想的可吸收止血材料面市。因此开发性能更为优良的相关产品显得很有必要。

【发明内容】

本发明的目的就是为了克服现有制备的止血贴不可吸收、容易引起机体过敏、止血效果差等缺点，提供了一种基于鼠尾胶原蛋白制备的具有人体内可吸收、生物相容性好、止血效果快的止血材料，本发明还提供这种止血材料的制备方法。

基于申请号为201210007089.5的发明专利申请“一种制备鼠尾胶原蛋白的方法”所叙述的方法，制备的鼠尾胶原经过SDS-PAGE鉴定后与I型胶原蛋白标准品(SIGMA产品)相比较无杂带，无任何差异，达到了SDS纯度。足以证明此种鼠尾胶原蛋白为单一的I型胶原蛋白。同时，制备所用鼠尾胶原蛋白经检测不存在任何潜在的生物安全问题，制备的胶原蛋白纯度高，品质好。

基于上述原理及制备方法，本发明模拟细胞外间质的组成特点，研制并推出了胶原蛋白为主要基质的医用生物材料。对胶原蛋白进行相应处理加工，制备成胶原蛋白溶液喷雾剂、胶原蛋白止血材料。

本发明制备止血材料的方法包括如下步骤：

1、选择聚乙烯醇、壳聚糖作为辅料，与鼠尾胶原蛋白联合，共同制成冻干止血材料或止血喷雾剂；各个材料重量配比为鼠尾胶原蛋白∶聚乙烯醇∶壳聚糖为1-10％∶0.2-5％∶0.2-2％，余量的水；

2、将鼠尾胶原蛋白∶聚乙烯醇∶壳聚糖混合后，用无菌水溶解后浇入培养小板，-40-0℃预冻2h-12h，再转入-80℃超低温冰箱急冻4h-12h，再转入真空冷冻干燥机中将复合材料在-4℃下冷冻干燥10-60h，即可以得到复合型冻干止血材料；Co60辐射灭菌，干燥保存；冻干的材料还可直接用于各种伤口的止血材料；