[发明专利]抗SPAG9抗体在肿瘤的早期辅助诊断中的用途

说明书

技术领域

本发明涉及抗体在肿瘤诊断中的用途，特别是涉及到抗体在肿瘤的早期辅助诊断中的用途。

背景技术

SPAG9（Sperm-Associated Antigen 9，SPAG9）蛋白特异性的定位于精子头部顶体的赤道板区，在精子附着到卵子上以及随后发生的受精过程中起着重要的作用，采用抗SPAG9自身抗体进行去透明带仓鼠卵穿透试验，发现人精子穿透明显的被抑制，考虑到顶体囊前部高浓度的SPAG9以及它的赤道定位，这种强烈的抑制精子结合的现象表明SPAG9作为一种精子表面相关抗原在精卵结合中发挥着重要作用。

正常情况下SPAG9只在睾丸的生殖细胞中表达，偶尔在胎盘中表达，在精子附着到卵子上以及随后发生的受精过程中起着重要的作用，2004年发现SPAG9是癌-睾丸抗原家族的新成员，作为一种支架蛋白与JNK（c-Jun-NH2-knase）结合，参与JNK信号通路，在细胞的生存、增殖、凋亡和肿瘤的发育等生理过程中扮演重要调节角色。2007年印度学者Manoj Garg等采用逆转录PCR、免疫组织化学、Western Blot以及Elisa等方法检测了SPAG9在mRNA和蛋白水平在上皮细胞卵巢癌（Epithelial Ovarian Cancer EOC）中的表达以及EOC患者血清中抗SPAG9抗体的表达。他们发现在mRNA和蛋白水平上皮细胞卵巢癌患者中有90%的患者癌症组织中有SPAG9的表达，其中67%的患者血清中有抗SPAG9的抗体存在。次年他们还发现SPAG9也在大多数肾细胞癌（RCC）患者组织中高表达，而且发现SPAG9与体外培养的RCC细胞的运动力、转移和入侵有关，另外体外细胞培养以及体内裸鼠实验也证明采用siRNA敲除SPAG9后有效的阻止了癌细胞（组织）的增殖和生长。2009年Deepika Kanojia等发现88%的乳腺癌患者在mRNA和蛋白水平有SPAG9的表达，同时有80%的患者血清中检测到SPAG9自身抗体；而且他们还发现各种水平的表达早期阳性检出率大大高于晚期。后来又有学者相继发现SPAG9在甲状腺癌、子宫颈癌患者早期以及恶性血液系统疾病等均有较强的表达，这意味着SPAG9有可能作为一种非特异性的广谱肿瘤早期标志物应用于临床肿瘤辅助诊断，尤其是体液免疫反应的存在，容易建立检测方法，将大幅度提高肿瘤检测的敏感性。血清标本比组织容易获得，而且在肿瘤从细胞的改变到实体瘤组织的形成需要一定的时间，如果在肿瘤发生的早期能从患者外周血中检出SPAG9的表达，对肿瘤的早期诊断无疑是有帮助的。目前世界上还未见有关于肝癌患者SPAG9的表达以及外周血抗SPAG9抗体的相关报道，也未见肺癌患者外周血抗SPAG9抗体的相关报道。而本实验室在实验中的发现是一个有价值的线索。

 一直以来，血清中肿瘤相关抗原（Tumor-Associated Antigens，TAA）被认为是肿瘤早期诊断的血清学标志物，为了寻找TAA人们进行了大量的研究工作，但由于其量的微小以及容易降解或在一定时间内经血液循环清除使得能用于临床诊断的理想的TAA并不是很多。而TAA一旦被免疫系统识别引起了体液免疫反应即是一种放大了的信号，所以人们最近把注意力转向寻找抗TAA自身抗体作为生物学标志而不再是瞄准TAA本身，因为这种抗体在正常个体和非癌状态下不表达或者低表达，其在血清中存在的时间上的持续性及稳定性优于包括TAA在内的其他的标志物。但大多TAA是自身蛋白质，有可能免疫原性不强，所以，寻找能被自身免疫系统识别的TAA是关键。一般而言，肿瘤抗原刺激产生的自身抗体可以在肿瘤确诊前一年检出。比如HCC有一个特征就是肝硬化、肝炎是其前期改变，当血清中出现自身抗体时提示恶变，这种抗体反应是诱导癌变的细胞蛋白刺激机体的免疫系统产生的。

发明内容

本发明的目的是提供一种抗SPAG9抗体在肿瘤的早期辅助诊断中的用途。

特别涉及到肺癌、肝癌患者的诊断。