[发明专利]从对萼猕猴桃叶中分离制备高纯度黄酮苷类化合物的方法

说明书

技术领域

本发明涉及一种从对萼猕猴桃叶分离制备黄酮苷类化合物，即山柰酚-3-O-α-L-鼠李糖基-(1→3)-α-L-鼠李糖基-(1→6)-β-D-吡喃半乳糖苷、山柰酚-3-O-α-L-鼠李糖基-(1→3)-(4-O-乙酰基-α-L-鼠李糖基)-(1→6)-β-D-吡喃半乳糖苷和山柰酚-3-O-α-L-鼠李糖基-(1→3)-(2，4-二-O-乙酰基-α-L-鼠李糖基)-(1→6)-β-D-吡喃半乳糖苷的工艺方法。

背景技术

对萼猕猴桃(Actinidia valvata Dunn)为猕猴桃科猕猴桃属植物，主要分布于安徽、浙江、江西等华东地区，其根为猫人参，为华东地区常用的抗肿瘤中药。近年来，发明人投入大量精力对该药用植物进行了系列药学研究[H.L.Xin，Y.C.Wu，Y.F.Xu，et al.Chin J Nat Med.，2010，8：260；H.L.Xin，X.Q.Yue，Y.F.Xu，et al.Helv.Chim.Acta，2008，91：575；Y.F Xu，R.L.Ge，J.Du，et al.Cancer Lett，2009，284：229；张亚妮，刘岭，凌昌全.中国中药杂志，2006，36：918.]，所获研究成果处于该领域先进水平。由于长期以来对萼猕猴桃以根入药，自然更新缓慢，野生资源急剧减少。为扩大该药用植物的药用部位，发明人还对其叶的化学成分、药理作用进行了深入研究，是该领域中最早开展此项研究工作的学者。经研究发现其叶中主要含有皂苷、黄酮类化学成分等[H.L.Xin，Y.C.Wu，Y.F.Xu，et al.Chin J Nat Med.，2010，8：260；H.L.Xin，Y.C.Wu，Y.H.Su，et al.Planta Med.，2011，77：70.]，其中山柰酚-3-O-α-L-鼠李糖基-(1→3)-(4-O-乙酰基-α-L-鼠李糖基)-(1→6)-β-D-吡喃半乳糖苷和山柰酚-3-O-α-L-鼠李糖基-(1→3)-(2，4-二-O-乙酰基-α-L-鼠李糖基)-(1→6)-β-D-吡喃半乳糖苷系由本发明人通过采用经典硅胶柱色谱法首次从对萼猕猴桃叶中制备得到，纯度在98％以上[H.L.Xin，Y.C.Wu，Y.H.Su，et al.Planta Med.，2011，77：70.]，它们具有显著的抗氧化、抗心肌缺血的药理作用，并分别就其化学结构、药理作用申请了中国专利(申请号：CN201010138085.1、CN201110271050.X)。化合物山柰酚-3-O-α-L-鼠李糖基-(1→3)-α-L-鼠李糖基-(1→6)-β-D-吡喃半乳糖苷，与上述两个化合物结构相似，该单体已有报道从山茶及蛇莓中分离制备得到[许文东，林厚文，邱峰，等.沈阳药科大学学报，2007，24：402；C.Lakenbrink，T.M.L.Lam，U.H.Engelhardt，et al.Nat.Prod.Lett.，2000，14：233.]。前述三种黄酮苷类化合物的化学结构式如下：

(I)山柰酚-3-O-α-L-鼠李糖基-(1→3)-α-L-鼠李糖基-(1→6)-β-D-吡喃半乳糖苷

(II)山柰酚-3-O-α-L-鼠李糖基-(1→3)-(4-O-乙酰基-α-L-鼠李糖基)-(1→6)-β-D-吡喃半乳糖苷

(III)山柰酚-3-O-α-L-鼠李糖基-(1→3)-(2，4-二-O-乙酰基-α-L-鼠李糖基)-(1→6)-β-D-吡喃半乳糖苷。

尽管上述三种黄酮苷类化合物可采用传统的柱色谱法分离得到，然而费事费力，污染环境，而且所用固定相对样品会有不可逆的吸附作用，造成样品的回收率下降。

高速逆流色谱(High-speed counter-current chromatography，HSCCC)是一种液液分配色谱技术，它不用任何固体支撑体或载体，因而克服了传统分离方法对样品的不可逆性吸附的弊端，样品回收率高，同时还具有应用范围广、仪器操作简单、制备量大等优点，已被广泛应用于天然产物的分离制备中。

发明内容

针对上述三种化合物采用传统的柱色谱法分离费事费力，污染环境，而且所用固定相对样品会有不可逆的吸附作用，造成样品的回收率下降等缺陷，本发明所要解决的技术问题是提供了一种新的快速、简便、高效的从对萼猕猴桃叶中分离此三种黄酮苷类化合物的制备工艺，以克服现有技术中存在的上述缺陷。