[发明专利]马属动物精液稀释基础液及其配制方法和使用方法

说明书

                              

技术领域

本发明涉及动物精液保存的技术领域，特别涉及一种马属动物精液稀释基础液及其配制方法和使用方法。

 

背景技术

精液稀释是向精液中加入适宜精子体外存活并保持精子活力的稀释保护液，其目的在于扩大精液的容量，延长精子的存活时间，保证精子的活率和精子顶体完整率，增强受精能力，充分提高精液的利用率和优良公畜配种的效率。精液稀释应在采集后尽快进行，不经稀释的精液不利于精子存活，特别是精液处于温度较低时（20℃以下），精子受低温打击，易出现冷休克。只有经过稀释的精子才适于保存、运输及输精等，所以精液稀释处理是动物人工授精中的一个重要技术环节。

目前，我国马属动物的繁育主要以自然交配和人工辅助两种方式进行，但是在自然交配或人工辅助交配的情况下，一般一匹种公马只能配20-30匹母马，优秀种公马的利用率严重受限。因此，精液稀释、保存和人工授精技术的发展和应用就显得非常重要。

近年来，家畜精液稀释液的研究不断取得可喜的成果，尤其是在牛、羊等反刍动物方面。马属动物精液稀释液的研究也日渐成效，但是仍然存在诸多弊端，主要表现在精液稀释液对精子活力的保存时间短，比如常温保存时间不足24小时（活率低于0.3），低温保存时间不足96小时（活率低于0.3）；受胎率低；精液稀释液需新鲜，必须现用现配，所以操作繁琐复杂。因此开发出保存时间长，保存效果好，成本低，受胎效果好的精液稀释液对人工授精而言有重要的经济效益。

 

发明内容

为了解决传统的精液稀释液对精子活力的保存时间短、受胎率低及现用现配等问题，本发明提供了一种马属动物精液稀释基础液及其配制方法和使用方法。

为了实现上述发明目的，本发明提供了一种马属动物精液稀释基础液，所述基础液包括A液和脱脂奶，所述A液包括葡萄糖、棉子糖、D-乳糖单水合物、柠檬酸三钠、柠檬酸钾和HEPES。

其中，所述A液和所述脱脂奶的混合体积比例优选为1:1。

每500ml的所述A液中，各组分的含量为：葡萄糖22~26g、棉子糖1.5~1.7g、D-乳糖单水合物1.5~1.7g、柠檬酸三钠Na₃C₆H₅O₇·2H₂O 0.2~0.25g、柠檬酸钾0.35~0.45g、HEPES 4.6~4.8g。

每500ml的所述A液中，各组分的含量为：葡萄糖22~26g、棉子糖1.5~1.7g、D-乳糖单水合物1.5~1.7g、柠檬酸三钠Na₃C₆H₅O₇·5H₂O 0.25~0.3g、柠檬酸钾0.35~0.45g、HEPES 4.6~4.8g。

所述葡萄糖为无水葡萄糖，其分子式为C₆H₁₂O₆；所述棉子糖的分子式为C₁₈H₃₂O₆·5H₂O；所述D-乳糖单水合物的分子式为C₁₂H₂₂O₁₁·H₂O；所述柠檬酸钾的分子式为K₃C₆H₅O₇·H₂O；所述HEPES的分子式为C₈H₁₈N₂O₄S。

 

本发明还提供了上述任意一种马属动物精液稀释基础液的配制方法，所述配制方法包括：

（1）称取所需要量的葡萄糖、棉子糖、D-乳糖单水合物、柠檬酸三钠、柠檬酸钾和HEPES ，放入无菌烧杯中，加双蒸水溶解后，定容、过滤、分装、灭菌、密封，即得A液；

（2）将经过严格灭菌、密封的A液标记配制时间，置于0~5℃保存，随用随取；

（3）取所需要量的A液加入适量的脱脂奶混合均匀后，即得基础液。

 

本发明还提供了一种马属动物精液稀释基础液的使用方法，其特征在于，将所述基础液置于37℃恒温水浴锅中1小时后，对马属动物新鲜精液进行稀释，用于鲜精的人工授精。