[发明专利]一种多噬伯克霍尔德氏菌及其在促进松树生长中的应用

说明书

技术领域

本发明属于微生物技术领域，具体涉及一种松树根际高效解磷细菌多噬伯克霍尔德氏菌及其在促进松树生长中的应用。

背景技术

磷素是植物营养三大要素之一，是植物体内核酸及多种酶、辅酶等的重要组成成分，同时又以多种方式参与植物体内的各种生理生化过程，对促进植物的生长发育和新陈代谢起着重要作用，缺磷会导致植物生长发育停滞，根系发育不良，植物矮小，生物量严重下降。因此，磷元素是植物必不可缺的营养元素。

土壤中含有大量储备磷，可分为无机态磷和有机态磷，但主要以非溶态存在。土壤中的磷主要通过吸附、沉淀、生物固持三种方式固定，土壤中95％以上的磷素与土壤中Ca²⁺、Fe²⁺、Fe³⁺、Al³⁺等金属离子结合而丧失其有效性。施入土壤中的磷肥大部分会发生专性吸附和化学沉淀被固定，以植物难以吸收利用的难溶性的磷酸盐形式在土壤中积累起来，利用率很低；而且大量施用磷肥既耗竭有限的磷矿资源又加剧环境的富营养化。因此，通过生物技术途径来解决这一问题越来越受到人们的重视。

解磷细菌(Phosphobacteria)是土壤磷循环中的主要微生物类群，其对改善植物磷素吸收和生长具有重要作用。解磷细菌能够促进植物对各种营养元素的吸收，促进植株根系的生长，提高植物对磷的利用率，改善植物的营养条件，提高植株的产量，增加植株抗病能力，另外还可以改善土壤结构，提高有机质含量，改良盐碱地对培育和充分发挥土壤生态肥力、保持农林业生态环境的平衡等均具有极其重要的作用。

松树分布很广，是我国山地、荒漠造林、沟壑治理，庭园绿化的主要造林树种之一，具有巨大的生态和经济价值。但松树一般种植在贫瘠的土壤中，人工育苗成活率不高，生长缓慢，生物量低。其中，磷素供应不足是突出而具普遍性的问题，造成了我国大部分地区的松树生长不良，抗逆性下降。松树根际高效解磷细菌能够提高土壤中难溶性磷的植物有效性和磷肥利用率，改善松树人工林生产中的磷素供应不足的矛盾、促进松树的生长发育。目前，有关松树根际高效解磷细菌的筛选及应用研究鲜见报道。

发明内容

发明目的：针对现有技术中存在的不足，本发明的目的是提供一种用于松树根际高效溶解难溶性无机磷及有机磷的多噬伯克霍尔德氏菌。本发明的另一目的是提供上述多噬伯克霍尔德氏菌在促进松树生长中用途。

技术方案：为了实现上述发明目的，本发明采用的技术方案为：

一种多噬伯克霍尔德氏菌，其分类命名为多噬伯克霍尔德氏菌(Burkholderia multivorans)WS-FJ9，已保藏于中国典型培养物保藏中心，保藏编号是CCTCCNO：M2011435，保藏日期：2011年12月1日。

上述多噬伯克霍尔德氏菌WS-FJ9的基因型为基因型II。

多噬伯克霍尔德氏菌WS-FJ9，从福建省沙县官庄林场28年生湿地松纯林根际土壤中筛选获得，主要生物学特征包括：在牛肉膏蛋白胨培养基平板上，菌落较小，颜色黄白，圆形、边缘整齐；菌体短杆状，革兰氏染色阴性，无芽孢，好氧，氧化酶反应阴性，接触酶试验阳性，淀粉水解试验阴性，M.R.试验阴性，V.P.试验阳性，明胶水解试验阴性，硝酸还原试验阳性，产氨试验阳性，硫化氢试验阴性，柠檬酸盐生长试验阳性。

采用接种洋葱、烟草(用于判断菌株对植物的致病性)以及接种苜蓿(用于判断菌株对动物的致病性)等方法对属于Bcc基因型II的多噬伯克霍尔德氏菌(Burkholderia multivorans)WS-FJ9菌株进行安全性测定，结果表明该菌株对洋葱和苜蓿没有致病性，对烟草有微弱毒性，但无致病性。

WS-FJ9菌株的16SrDNA基因序列，见氨基酸或核苷酸序列表1。将所测16SrDNA序列与GenBank数据库中的序列进行BLAST比对。结果表明，WS-FJ9菌株与伯克霍尔德氏菌属(Burkholderia)同源性都很高，其中与Burkholderia multivorans的相似度为98％。通过利用Biolog系统自动分析鉴定，与Burkholderia multivorans的Biolog相似性PROB 99％，相似值SIM0.551，结合形态、生理生化特征及16SrDNA序列分析，鉴定为多噬伯克霍尔德氏菌(Burkholderia multivorans)。

上述多噬伯克霍尔德氏菌WS-FJ9在促进松树生长中的应用。

上述的多噬伯克霍尔德氏菌WS-FJ9在解磷中的应用。