[发明专利]虎眼万年青超滤分离法提取皂甙工艺

说明书

技术领域

本发明是涉及中草药技术领域中的一种提取工艺，是从虎眼万年青花卉植物中提取具有抗癌作用的皂甙类化合物原料。

背景技术

虎眼万年青提取皂甙类化合物的生产工艺，目前国内有CO2萃取、乙醇超声提取、水煎煮提取、酶解法提取，但大都采用化学溶剂进行处理，有的还用蒸馏法提取皂甙。采用化学溶剂处理后会有等量的残留存在。事必给药物原料增加了不必要的有害含量，而高温蒸馏法提取皂甙，虽然简单易操作，但100℃以上的高温状态下，至使皂甙类化合物处于超稳定的高温界度外而失活。本发明研究实验表明，皂甙类化合物在85℃时，其生理活性处于不稳定状态，90℃以上时将会逐步灭活。

所以，本发明采用乙醇浸泡，超滤膜分离，AB-8树脂柱吸附和透析脱色去杂的方法提取皂甙化合物，目前这种超滤法提取工艺在国内还不多见。

发明内容

本发明的目地是向国内外药企提供从虎眼万年青全株中，提取皂甙类化合物抗癌药物原料，为制做和确保口服抗癌制剂原料的得取率和安全性，提供科学的技术路线支撑，其工艺是：

操作工艺说明：

1、首先将2年生的虎眼万年青球、茎、叶全株干品10kg去杂，用O3水清洗表面的泥土和氧化表面的细菌、病毒。沥干水分后切片、烘干、用纳米级超微粉碎机超微粉碎300目甚至更小的微粒，促使虎眼万年青中的皂甙类化合物破壁脱壳。

2、由于皂甙类化合物不溶于水、易溶于乙醇的特性，采用95％的医用乙醇恒温浸泡6h，同时将液温间接加人至皂甙类化合物生理活性尚处稳定的界度内，6h后快述搅拌20min，以促使皂甙类化合物在适宜温度下的流相冲击中剥离出来，以提高皂甙类化合物的得取率，然后，用300目滤网过滤去渣，滤渣再继续浸泡，依次浸泡3次，收集滤液合并。

3、脱脂处理，由于虎眼万年青中含有许多脂类化合物，将合并的滤液间接加温使滤液温升到50-70℃时，诸多脂类物质会随温升逐渐漂浮上来，这时，用吸油纸将其吸附出来，以保持溶液的纯净度。

4、沉淀去杂，由于虎眼万年青中含有较多的多糖，而多糖易溶于水、不溶于乙醇的特性，采用醇沉法，也就是将乙醇脱脂的溶液温度降至6-15℃时，粗多糖、蛋白质等杂质会缓慢聚积沉淀，一般沉淀12h即可，用吸管虹吸上层乙醇溶液，沉淀物集中回收在提取多糖。

5、低压大孔超滤，采用超滤膜分离机，设定分离粒度为0.02um，而皂甙化合物粒度为0.01-0.002um。所以首先将盛有乙醇溶液的容器加压10mpa，缓慢放出，经0.02um大孔超滤截留，截留物为粗纤维、微尘、胶质等无利用价值的杂质，透过液为皂甙类等大小分子的混合液。

6高压小孔超滤，将低压大孔超滤透过液加压30mpa，缓慢放出经高压小孔0.001um超滤分离机的超滤截留，即得皂甙类化合物大分子浓缩液。

7、将高压小孔小分子透过液经AB-8树脂柱吸附小分子皂甙，将流出的乙醇液蒸馏回收再利用。这时，用70℃的热水洗脱柱上的小分子低聚糖，然后再用70℃的95％乙醇洗脱柱上的皂甙结晶物，将乙醇洗脱液与高压小孔截留液合并、搅匀。

8、将合并液通过装有竹质活性炭、碳酸纤维丝的析管透析机内进行脱色，吸附小分子低聚糖等其它小分子化合物杂质，将析出的溶液再经浓缩罐真空渗透，同时间接加温60℃，间歇式吸空浓缩12h左右，待浓缩液变成膏体状时取出。

9、将膏体状浓缩物放入一薄壁的不锈钢盘内，经冷冻干燥机进行24h真空冷冻干燥，待含水份在4％以下时，取出，即成为微黄色半透明状的结晶块。

10、将结晶块通过不锈钢高速粉碎机快速粉碎成80目的粒度，即成为抗癌药物的主要原料，形态微黄色不规则结晶粉状。

11、经计算得出虎眼万年青总皂甙提取率为58％，粗皂甙化合物含量在60％以上。

本工艺采用超微粉碎破壁，醇沉杂质，超滤，AB-8柱吸附、透析、真空冷冻干燥作用，大大提高了产品得率，而且操作简单、能耗少、无化学处理，工序简捷、提取率高，产品皂甙含量高。也可将高压小孔截留液经AB-8柱多次吸附，洗脱，制备均一的精品虎眼万年青皂甙。超滤法还能够有效的消除原料中的病毒、细菌、热源和内毒素，使得总皂甙化合物的毒性降至最小值，而且有效的生理活性不被破坏。这对于分子量大且分布范围较宽，溶液黏度大且又不稳定的皂甙类化合物来讲，无疑是一种极具发展潜力的提取分离方法。

具体实施方式

虎眼万年青超滤分离法提取皂甙工艺，其主要方法是：