[发明专利]利用鸟苷发酵废液生产高蛋白饲料的方法

说明书

技术领域

本发明属于环境工程和生物工程领域，具体来说是一种利用鸟苷发酵废水生产蛋白饲料的方法。

背景技术

鸟苷又名鸟嘌呤核苷或9-(β-D-呋喃核糖基)鸟嘌呤。鸟苷的用途十分广泛，可用于合成食品增鲜剂—5`-鸟苷酸二钠、呈味核苷酸二钠以及作为医药产品的重要中间体，可形成一系列的下游医药产品，包括核苷类抗病毒药物如利巴韦林、阿昔洛韦等，也是用于制造无环鸟苷(Acyclovir)、三氮唑核苷(ATC)、三磷酸鸟苷钠(GTP)等药物的主要原料。目前，国内市场鸟苷需求量大约在3 500吨/年，且以每年10%的速度增长。

鸟苷生产采用发酵法，该法会产生大量发酵废水。鸟苷发酵废水中残糖量约为3%，总氮含量约为0.6%，氨氮含量约为0.5%，无机盐含量约为4.0%-5.0%，废液pH7.0，是一种高BOD、高氨氮营养丰富的有机废水，直接排放会造成水体生物因缺氧而大量死亡，处理后达标排放不仅增加生产成本，而且废水中的营养成分不能充分利用，造成资源浪费。

发明内容

本发明的目的就是解决鸟苷发酵废液直接排放对环境的污染问题，另一目的就是提供一种利用鸟苷发酵废水生产蛋白饲料的方法。

本发明解决上述技术问题所采用的技术方案是：利用鸟苷发酵废水生产蛋白饲料的方法，其特征在于包括有以下步骤：

1）在1 L鸟苷发酵废水中补加蔗糖0.5 g-2.0 g，蛋白胨0.1 g -0.5 g，酵母膏0.5 g -1.0 g，得到生产蛋白饲料的发酵培养基； 

2）菌种活化，分别挑取枯草芽孢杆菌、地衣芽孢杆菌、酵母菌接种于相应的斜面培养基上，于30℃-37℃，培养10 hr-20 hr，分别得到枯草芽孢杆菌、地衣芽孢杆菌、酵母菌的斜面种子；

3）摇瓶种子培养，将步骤2）得到的活化好的枯草芽孢杆菌、地衣芽孢杆菌、酵母菌的斜面种子分别接种至三角摇瓶中进行培养，得到枯草芽孢杆菌、地衣芽孢杆菌、酵母菌的摇瓶种子；

4）发酵种子培养，将步骤3）中培养的枯草芽孢杆菌、地衣芽孢杆菌、酵母菌的摇瓶种子按体积百分比5%-10%的接种量分别接种于种子罐中，于30℃-37℃，培养20 hr-40 hr，得到枯草芽孢杆菌、地衣芽孢杆菌、酵母菌的种子液；

5）混合发酵培养，将步骤4）中培养的枯草芽孢杆菌、地衣芽孢杆菌、酵母菌的种子液，采用步骤1）所述的发酵培养基，按5%-10%的总接种量接种于发酵罐中，于34℃-36℃，通风比为0.13-0.15，培养40 hr-48 hr，得到混合培养液；

6）喷雾干燥，将步骤5）的混合培养液进行喷雾干燥、粉碎，即得蛋白饲料。

按上述方案，步骤2）所用的用于菌种活化的斜面培养基为：枯草芽孢杆菌的斜面培养基组成为：葡萄糖0.5 g，蛋白胨0.6 g，酵母膏0.7 g，氯化钠0.5 g，琼脂2.0 g，去离子水100 mL；地衣芽孢杆菌的斜面培养基组成为：葡萄糖0.5 g，蛋白胨0.7 g，酵母膏0.8 g，氯化钠0.5 g，琼脂2.0 g，去离子水100 mL；酵母菌的斜面培养基组成为：蔗糖2.0 g，酵母膏0.8 g，氯化钠0.5 g，琼脂2.0 g，去离子水100 mL。

按上述方案，步骤3）中摇瓶种子培养条件为，枯草芽孢杆菌采用如下培养基：在100 mL鸟苷发酵废水中补加酵母膏1.0 g-3.0 g，培养基pH7.0，于35℃-37℃，200 rpm振摇培养20 hr-24 hr；地衣芽孢杆菌采用如下培养基：在100 mL鸟苷发酵废水中补加蛋白胨0.5 g-1.5 g、酵母膏1.0 g-2.0 g，培养基pH7.0，于35℃-37℃，180 rpm振摇培养26 hr-30 hr；酵母菌采用如下培养基：在100 mL鸟苷发酵废水中补加酵母膏0.5 g-1.0 g、蔗糖0.5 g-2.0 g，于28℃-32℃，150 rpm振摇培养40 hr-48 hr。