[发明专利]一种包裹亚甲蓝的靶向PLGA荧光探针及其制备方法

说明书

技术领域

本发明属于纳米医学领域，涉及一种亚甲蓝纳米颗粒的制备方法，具体地说是一种包裹亚甲蓝的靶向PLGA荧光探针及其制备方法。

背景技术

基于癌症在人类健康中的威胁以及利用活体荧光成像对肿瘤组织进行诊断的优势，发展效果好的成像制剂就成了当前科学研究和临床研究的一个重要方面。现在常用于活体荧光成像的成像探针，大多数为传统的有机染料分子，如亚甲蓝、罗丹明、FITC、Cy3，而这些有机染料分子有着其本身的一些缺点，如光稳定性差，灵敏度低，疏水性强和靶向性差等缺陷，因而限制了其进一步的应用。发展能解决上述问题的纳米荧光探针对于肿瘤的成像诊断和光动力学治疗具有非常重要的意义。

发明内容

本发明所要解决的技术问题是针对上述现有技术现状，而提供工艺简单、制造成本低，光稳定性强，核心是亚甲蓝，其外壳主要为PLGA，并交联有能有效识别体外肿瘤的叶酸分子的一种包裹亚甲蓝的靶向PLGA纳米颗粒及其制备方法。

本发明解决上述技术问题所采用的技术方案为：

一种包裹亚甲蓝的靶向PLGA荧光探针，其中，靶向PLGA荧光探针以亚甲蓝为内核，以PLGA为壳膜，且PLGA通过1-乙基-3-(3-二甲基氨丙基)-碳化二亚胺交联有叶酸分子，靶向PLGA荧光探针为包裹亚甲蓝的靶向PLGA纳米颗粒。

为优化上述技术方案，采取的措施还包括：

制备上述的一种包裹亚甲蓝的靶向PLGA荧光探针的方法，其中，包括以下步骤：

步骤1、将含有羧基的PLGA溶于二氯甲烷中，制备成PLGA溶液；

步骤2、将亚甲蓝溶于聚乙烯醇溶液中，制备成含亚甲蓝的聚乙烯醇溶液；

步骤3、将步骤1制备的PLGA溶液滴加入步骤2制备的含亚甲蓝的聚乙烯醇溶液中，将混合液在冰浴条件下用探针式超声波超声振荡，滤去溶液，将余物离心水洗，制得包裹亚甲蓝的PLGA纳米颗粒；

步骤4、将步骤3制得的包裹亚甲蓝的PLGA纳米颗粒与1-乙基-3-(3-二甲基氨丙基)-碳化二亚胺、羟基琥珀酰亚胺混合，室温下反应，再加入叶酸，充分混合后，滤去溶液，将余物水洗，制得包裹亚甲蓝的靶向PLGA纳米颗粒。

上述的步骤1的PLGA溶液中PLGA所占浓度为0.1mg/mL。

上述的步骤2的聚乙烯醇溶液中聚乙烯醇占的质量百分比为2%。

上述的步骤2的含亚甲蓝的聚乙烯醇溶液中亚甲蓝所占浓度为0.01mg/mL。

上述的步骤3中参与混合的含亚甲蓝的聚乙烯醇溶液与PLGA溶液体积比为5:1。

上述的步骤4中包裹亚甲蓝的PLGA纳米颗粒与1-乙基-3-(3-二甲基氨丙基)-碳化二亚胺、羟基琥珀酰亚胺按摩尔比1:1:2比例混合。

上述的步骤4中加入的叶酸与参与混合的包裹亚甲蓝的PLGA纳米颗粒摩尔比为1:1。

与现有技术相比，本发明的一种包裹亚甲蓝的靶向PLGA荧光探针，其中，靶向PLGA荧光探针以亚甲蓝为内核，以PLGA为壳膜，且靶向PLGA荧光探针通过1-乙基-3-(3-二甲基氨丙基)-碳化二亚胺交联有叶酸分子，靶向PLGA荧光探针为包裹亚甲蓝的靶向PLGA纳米颗粒。PLGA有良好的生物相容性，可生物降解并通过正常的生理途径排出体外。亚甲蓝包裹入PLGA后，增加亚甲蓝的光稳定性；同时颗粒交联上叶酸后能够在活体内靶向识别肿瘤，该颗粒制造成本低，便于操作推广。靶向识别肿瘤作用的机理源于人类的一些恶性肿瘤细胞对于叶酸受体的高表达。包裹亚甲蓝的靶向PLGA纳米颗粒可以被活体成像系统成像。

附图说明

图1是实施例中实验小鼠一静脉注射包裹亚甲蓝的PLGA纳米颗粒后的活体成像；

图2是实施例中实验小鼠二静脉注射包裹亚甲蓝的靶向PLGA纳米颗粒后的活体成像。

具体实施方式

以下结合附图对本发明的实施例作进一步详细描述。

本发明的一种包裹亚甲蓝的靶向PLGA荧光探针，其中，靶向PLGA荧光探针以亚甲蓝为内核，以PLGA为壳膜，且PLGA通过1-乙基-3-(3-二甲基氨丙基)-碳化二亚胺交联有叶酸分子，靶向PLGA荧光探针为包裹亚甲蓝的靶向PLGA纳米颗粒。以DelsaTM Nano C粒度分布测定仪进行检测，包裹亚甲蓝的靶向PLGA纳米颗粒平均粒径为323nm。

制备上述的一种包裹亚甲蓝的靶向PLGA荧光探针的方法，包括以下步骤：

步骤1、将含有羧基的PLGA溶于二氯甲烷中，制备成PLGA溶液；