[发明专利]一种植物乳杆菌亚硝酸盐还原酶基因及其编码的蛋白质和应用

说明书

技术领域

本发明属于基因工程技术领域，具体涉及一种植物乳杆菌亚硝酸盐还原酶基因，含有该基因的重组载体、用该载体转化的宿主以及利用该转化体生产该基因的表达产物及其应用。

背景技术

亚硝酸盐还原酶是一类催化亚硝酸盐还原的酶。亚硝酸盐广泛存在于腌制或新鲜食物以饲料中。食品中亚硝酸盐的过量，会使血红蛋白氧化成高铁血红蛋白，降低血液的载氧能力，造成高铁血红蛋白血症，对人体造成严重危害。亚硝酸盐还可在人体内与仲胺、叔胺和氨基化合物反应形成强致癌物亚硝胺化合物，从而诱发消化系统癌变。鉴于食品中超标亚硝酸盐污染可引起食品安全问题，人们正在努力寻找有效控制或降解亚硝酸盐的方法，生物酶法消除食品亚硝酸盐是一条可行的途径。

迄今，有不少报道认为植物乳酸菌具有降解亚硝酸盐的能力，并推测植物乳酸菌降解亚硝酸盐与所含的亚硝酸盐还原酶有关。然而，目前植物乳酸菌亚硝酸盐还原酶的基因及其基因编码的酶蛋白序列还未见研究报道。

参考文献

[1] 王琦，李悦鹏，娄峰阁．亚硝酸盐的危害及其替代物的研究进展[J].中国饮食卫生与健康， 2005，2 (9)：36-37

[2] 孙菲菲，蒋芳玲，侯喜林，李英等. 白菜亚硝酸还原酶基因BcNiR的克隆及表达分析[J]. 园 　 艺学报，2009, 36 (10) : 1511-1518

[3] Eugene J. Mitacek, Klaus D. Brunnemann, Maitree Suttajit, Lee S. Caplan. Geographic Distribution of Liver and Stomach Cancers in Thailand in Relation to Estimated Dietary Intake of Nitrate, Nitrite, and Nitrosodimethylamine[J]. Nutrition and Cancer, 60:2, 196-203

[4] 龚钢明，管世敏，邵海，吕玉涛. 降解亚硝酸盐乳酸菌的分离鉴定[J].食品工业，2009(5):12-13

[5] G. Wolf，W.  P. Hammes. Effect of hematin on the activities of nitrite reductase and  catalase in lactobacilli[J]. Arch Microbiol (1988) 149: 220 – 224

[6] Krishna P. Rai, Chunhui Zhang, Wen Shui Xia. Effects of pure starter cultures on physico-chemical and sensory quality of dry fermented Chinese-style sausage[J]. Food Sci Technol,2010, 47(2):188–194

[7] 陈燕红，程萍，喻国辉，潘丽晶. 沼泽红假单胞菌 Rhodopseudomonas palustris 2-8的亚硝酸盐还原酶基因克隆和序列分析[J]. 微生物学通报，2011, 38(5): 647?653

[8] Braker G, Fesefeldt A, Witzel KP. Development of PCR primer systems for amplification of nitrite reductase genes (nirK and nirS) to detect denitrifying bacteria in environmental samples[P]. Applied and Environmental Microbiology, 1998, 64(10): 3769?3775.

 [9] Lima I,Moreira S M,Osten J R V,et al．Biochemical responses of the marine mussel Myfilus  gal loprovincialis to petrochemical environmental contamination along the North-western   coast of Portugal [J].Chemosphere, 2006, 66 (7)：1230-1242.