[发明专利]一种纳米荧光微球，其制备方法及其用作免疫层析方法的标记物的用途

权利要求书

1.一种纳米荧光微球，具有核壳结构，其特征在于：所述的纳米荧光微球的粒径为200~500nm，其内核为包含有荧光分子的聚合物微球，外壳具有修饰在所述聚合物微球外表面上的一种或多种官能团，该所述官能团能够直接与配体或生物大分子反应形成微球表面的共价键连接，或在激活后与配体或者生物大分子进行共价标记；所述的聚合物微球为聚甲基丙烯酸甲酯的微球或甲基丙烯酸甲酯与其它单体共聚形成的共聚物的微球或者它们的混合物，其中甲基丙烯酸甲酯单元的重量至少占所述纳米荧光微球总重量的50%，所述的荧光分子的重量占所占纳米荧光微球总重量的0.05%~5%。

2.根据权利要求1所述的纳米荧光微球，其特征在于：所述甲基丙烯酸甲酯与其它单体共聚形成的共聚物中，甲基丙烯酸甲酯与所述其它单体的结构单元数均大于等于50。

3.根据权利要求2所述的纳米荧光微球，其特征在于：所述的其它单体为选自氟乙烯、氯乙烯、溴乙烯、乙烯碘化、苯乙烯以及丙烯酸中的一种或多种。

4.根据权利要求1所述的纳米荧光微球，其特征在于：所述的官能团为选自羧基，乙醇胺基，羟基，胺基，氨基，亚胺基，环氧基，异氰酸酯基，金属醇盐及聚乙二醇基中的一种。

5.根据权利要求1至4中任一项权利要求所述的纳米荧光微球，其特征在于：所述荧光分子为罗丹明、荧光素及其衍生物、肾上腺素染料及氟硼莹中的一种或多种。

6.根据权利要求5所述的纳米荧光微球，其特征在于：所述的荧光分子的重量优选为所述纳米荧光微球总重量的0.2%~5%。

7.根据权利要求1所述的纳米荧光微球，其特征在于：所述纳米荧光微球的粒径为350~400nm。

8.根据权利要求1所述的纳米荧光微球，其特征在于：所述纳米荧光微球还包含一种或者一种以上的通过所述官能团共价连接而覆盖在所述微球表面的生物活性物种，该所述的生物活性物种选自抗体、抗原、核酸、配体、受体、人工多肽、蛋白质以及多糖中的一种，所述的生物活性物种能够参与特异性识别和结合反应。

9.一种如权利要求1所述的纳米荧光微球的方法，其特征在于：包括如下步骤：

（1）、以所述聚合物的微粒和含有所述官能团的烯烃单体为原料，通过微乳液聚合法制备得到外表面上具有所述官能团的聚合物微球；

（2）、向步骤（1）所得外表面上具有所述官能团的聚合物微球中缓慢注入含有所述荧光分子的有机溶剂和水，聚合物微球发生溶胀，荧光分子进入聚合物微球内，然后离心，除去上清液，清洗，加水悬浮，即得所述纳米荧光微球，其中所述有机溶剂为丙酮或二氯甲烷。

10.权利要求1至8中任一项权利要求所述的纳米荧光微球用作免疫层析方法的标记物的用途。