[发明专利]ATP、氢氧化铝复合佐剂及含有该复合佐剂的疫苗

说明书

技术领域

本发明涉及一种复合佐剂，尤其涉及一种三磷酸腺苷二钠ATP与氢氧化铝的复合佐剂，以及含有该复合佐剂的疫苗，属于免疫学技术领域。

背景技术

佐剂是指与抗原同时或预先使用的，能有效增强机体针对抗原的免疫应答能力或改变免疫反应类型，其自身却不具有免疫原性、不能单独作用引起免疫应答的物质。理想的佐剂应具有以下特点：有效性、安全性、稳定性和经济性。目前常用的佐剂有氢氧化铝、脂质体、弗氏佐剂、粘膜免疫佐剂、CpG序列、皂角甙、细胞因子、纳米粒子以及其他天然来源的佐剂，它们都能够有效增强抗原的免疫原性，但是上市的并得到美国FDA批准的人用疫苗佐剂只有氢氧化铝佐剂，经欧盟批准并上市的疫苗佐剂还有MF59、重组霍乱毒素B亚单位和AS04几种。佐剂的研究比较广泛且深入，但是能够应用的却很少，其原因主要如下：首先，佐剂的安全性仍需要进一步提高；其次，佐剂的靶向性仍不强，增强疫苗免疫原性效果仍不够理想，因而制约了佐剂的应用范围；第三，多数佐剂的免疫作用机制仍不太明朗，虽然多种佐剂已被证实有很好的免疫增强效果，但目前国际上对其作用机理仍众说纷纭；第四，佐剂免疫途径的选择、剂量的设定，以及佐剂种类的选择等也是其开发中需要面对的问题。

人体内的na?ve CD4⁺T细胞能够分化为Th1和Th2两种亚型，Th1型主要以诱发迟发性变态反应为特征，Th2型主要以诱发特异性抗体的产生及分泌为标志。两种T细胞通过分泌相应的细胞因子相互制约。机体针对一种疫苗是产生Th1还是Th2免疫应答，将直接影响该疫苗对机体的保护作用。最理想的佐剂，应能够同时引起机体针对某种特异性抗原同时产生多种类型（如Th1和Th2）的免疫应答，同时具备安全性，即在达到成效后，还能在体内自行降解，并且无毒副作用或潜在的致癌、致畸作用，理化性质稳定，不易发生分解、变性，易于生产、运输和保存，生产成本低廉等。

氢氧化铝[Al(OH)₃]胶体佐剂是目前最重要的疫苗佐剂，自1926年Glenny首先应用铝盐粘附白喉类毒素至今，已广泛应用于人、兽疫苗，是国际上首个被批准用于人类的疫苗佐剂，经过几十年的使用，证实氢氧化铝作为免疫佐剂是有效的，现已广泛应用于乙肝、百白破三联疫苗等疫苗的生产中，并成为首选佐剂。天然的氢氧化铝有上百种存在形式，例如Al(OH)₃、Al₂O₃·H₂O、AlO(OH)等，而商品化的氢氧化铝佐剂实际上是Al(OH)₃的不完全脱水产物，即纤维状结晶形态的偏氢氧化铝[AlO(OH)]。使用中，由于商业氢氧化铝佐剂会因不同的生产批次而存在差异，国际上规定以丹麦生产的Alhydrogel为公认标准，其胶粒大小为3.07μm，形状近乎透明的溶胶，且胶体具有一定的吸附周边粒子的特性，疫苗佐剂正是利用了这一特性，即通过制备稳定的氢氧化铝胶体，使其粘附疫苗抗原，从而使抗原被限定在胶体行程的特定网格结构中，以形成特有的分子结构。氢氧化铝胶体佐剂的具体作用机制目前仍未完全阐明，但国际上普遍认为其作用机制主要有“储存库效应”和“免疫刺激效应”两种：氢氧化铝胶体佐剂分子结合抗原后，因为分子间作用力的作用，使抗原分子结构发生变化。一方面，对抗原的分子进行一定修饰，使其在进入人体后不易被降解，延长免疫刺激的时间；另一方面，分子的增大以及修饰后抗原表位的暴露可以引起更加强烈的免疫刺激效应，使疫苗抗原的效应性大大提高。近年来，通过一系列的相关研究，铝佐剂的作用机制也得到了进一步的阐述。研究表明，铝佐剂可以激活NALP3炎性淋巴因子，由此调控了包括IL-1β在内的一系列细胞因子的行为。体内研究表明，铝佐剂可以直接激活NLRP3缺陷的小鼠NLRP3因子，但是具体机制仍然不明。经过70多年的使用经历，铝佐剂的安全性得到了进一步的证实，但其佐剂效果却不及其他诸如油水佐剂显著。