[发明专利]酚类环境雌激素分子印迹固相萃取柱的制备方法

说明书

技术领域

本发明涉及一种固相萃取柱的制备方法，尤其涉及一种酚类环境雌激素分子印迹固相萃取柱的制备方法。

背景技术

酚类环境雌激素作为制备环氧树脂和聚碳酸酯塑料的添加剂，进入生物体内可造成内分泌失调，危害生物体生殖机能或引发恶性肿瘤，提高与激素相关的癌症并发率，其生物雌激素效应与环境毒性已引起国内外研究者的广泛关注。最新研究表明，0.1μg/L甚至更低量级的酚类环境雌激素可引起实验动物的生物效应，干扰生物体中内源性激素的分泌，其低剂量效应研究已成为当前酚类环境雌激素研究的一个重要方向。鉴于此，开展痕量酚类环境雌激素的富集净化与检测技术研究有益于促进卫生检验技术的进步。

由于酚类环境雌激素样品基质复杂、种类繁多、含量甚微（pg级），因此样品的富集净化技术成为其分析监测中的关键步骤。目前，酚类环境雌激素样品预处理的常用方法包括：液液萃取和固相萃取。固相萃取比液液萃取富集效率高、消耗有机溶剂少、操作简单和易于自动化等优点。然而，传统的固相萃取小柱多采用C₁₈、改性二氧化硅、三氧化二铝等颗粒作为填料，对酚类环境雌激素的富集效果及选择性较差。因此，设计对酚类环境雌激素具有高选择性和高富集倍数的固相萃取小柱对于其富集净化与检测技术的进步具有十分重要的现实意义。

分子印迹聚合物（Molecularly Imprinted Polymers，MIPs）主要是利用分子印迹技术制备的具有高亲和性和高选择性的可以识别和结合目标分子的特定受体。MIPs依靠形状、大小和化学功能基的分布对模板分子进行识别，具有专一选择性，因其制备方法多样、工艺相对容易控制、特异选择性强、具有结构和功能的可预期性、可调控性、可裁剪性而被广泛用于样品中酚类环境雌激素的分离富集。R. Zhu等报道了（R. Zhu, W. H. Zhao, M. J. Zhai, et al., Anal. Chim. Acta 2010, 658, 209.），以双酚A为模板分子、二氧化硅为载体的用于富集分离污水中双酚A的纳米级分子印迹聚合物。Y. S. Ji 等报道了（Y. S. Ji, J. J. Yin, Z. G. Xu, et al., Anal Bioanal Chem. 2009, 395, 1125.），以磁性纳米四氧化三铁为载体，以双酚A为模板分子，在外磁场作用下可以实现快速、有效的固液分离的纳米四氧化三铁磁性分子印迹聚合物。目前，关于酚类环境雌激素分子印迹固相萃取柱的制备方法尚未见报道。

发明内容

本发明的目的在于针对现有技术的不足，提供一种酚类环境雌激素分子印迹固相萃取柱的制备方法。本发明制备工艺简单、专一选择性强、富集效率高；所制备的酚类环境雌激素分子印迹固相萃取柱对水样和食品样品中残留的痕量酚类环境雌激素具有很高的选择性和极强的富集能力，并且可以显著降低基质效应。

为了解决上述技术问题，本发明采用的技术方案如下：一种酚类环境雌激素分子印迹固相萃取柱的制备方法，该方法包括以下步骤：

（1）将100~500mg酚类环境雌激素分子印迹聚合物与5~20mL纯有机溶剂混合，振荡5~30min后，超声5~30min至混合均匀，移至聚丙烯等材质的固相萃取小柱中，装填均匀后，两端分别用筛板封堵。

（2）将100~500mg 传统固相萃取填料与5~20mL纯有机溶剂混合，振荡5~30min后，超声5~30min至混合均匀，移至步骤1的固相萃取小柱中，装填均匀后，顶端用筛板封堵，用5~20mL酸性有机溶剂上柱清洗，然后用5~20mL纯有机溶剂上柱清洗，以除去酸性物质。

（3）将步骤2的固相萃取小柱用惰性气体吹扫除去残留的有机溶剂，然后30~90℃真空干燥1~24小时，制得酚类环境雌激素分子印迹固相萃取柱。

本发明的有益效果是：本发明所制备的酚类环境雌激素分子印迹固相萃取柱，具有制备工艺简单、专一选择性强、富集效率高的优点，并将其应用于富集生活饮用水及食品中残留的痕量酚类环境雌激素，能达到较高的富集倍数并可有效的降低基质效应。

附图说明

图1是根据本发明实施例，得到6种酚类环境雌激素的多反应监测（MRM）色谱图，图中，（1）双酚A；（2）己烯雌酚；（3）己烷雌酚；（4）4-叔辛基酚；（5）戊酸雌二醇；（6）4-壬基酚。

具体实施方式

本发明酚类环境雌激素分子印迹固相萃取柱的制备方法，包括以下步骤：