[发明专利]一种沙丁胺醇人工抗原及其制备的抗体

说明书

技术领域

本发明涉及一种沙丁胺醇人工抗原及其制备的抗体。

背景技术

沙丁胺醇(Salbutamol)，是一种选择性β2-受体激动剂(β-兴奋剂)，医疗中用于治疗喘息型支气管炎、支气管哮喘、肺气肿所致的支气管痉挛。该药物不是兽药，也不是饲料添加剂。由于沙丁胺醇检测手段的相对滞后，但又与克伦特罗具有同样促生长效果，因而逐步取代克伦特罗成为新一代“瘦肉精”，用于非法谋取经济利益。沙丁胺醇作为营养重分配剂添加到饲料中，可以促进动物瘦肉生长、减少脂肪产生、提升单位经济价值，但同时也会造成药物蓄积、残留在动物机体中。沙丁胺醇一次性摄入量较多时对人体存在多种毒副作用，可导致体内聚集浓度升高而继发心脏肥大，并造成心脏跳动过速，严重时会出现心肌梗死，长期摄入过量沙丁胺醇，可能产生生殖内分泌毒性。世界卫生组织、美国、欧盟及一些发达国家等都先后立法禁止在畜禽生产中使用β-兴奋剂作为促动物生长饲料添加剂。我国在农业部第235号公告中明确规定了禁止使用沙丁胺醇，并不得在所有动物性食品中检出。

目前，国家标准和行业标准中对饲料及动物源性食品中沙丁胺醇残留的检测常采用液相色谱-质谱/质谱法。虽然此方法特异性强、灵敏度高，但是样品前处理操作步骤繁琐，成本较高，也不适用于大批量样品的筛选检测。免疫分析，由于在抗原抗体的定性定量方面独特的优势和操作简便快速、成本低、灵敏度较高、分析样本量大的优点弥补了理化分析的不足，在β-兴奋剂的残留检测中起着越来越重要的作用。

影响免疫化学分析质量的根本因素是抗体的特异性与亲和性，这些性质又决定于免疫半抗原分子的结构，因此免疫半抗原的分子设计与合成就是产生特异性抗体和建立小分子兽药残留快速检测技术最基础和最关键的步骤。

发明内容

本发明的目的是提供一种沙丁胺醇人工抗原及其制备的抗体。

本发明提供了一种化合物，即式(I)所示化合物。式(I)所示化合物为将沙丁胺醇进行结构改造得到的化合物，在沙丁胺醇的苯酚基上引入活性官能团结构，既最大程度保留了沙丁胺醇的特征结构，又具有可以与载体蛋白发生偶联的活性基团。

本发明还保护式(I)所示化合物的制备方法，包括如下步骤：将沙丁胺醇与乙二醇二缩水甘油醚反应，获得所述化合物。所述反应具体可在碳酸氢钠水溶液中进行。优选浓度为3％(质量比)的碳酸氢钠水溶液。所述沙丁胺醇与乙二醇二缩水甘油醚的物质的量比具体可为1∶1。

式(I)

本发明还保护一种沙丁胺醇人工抗原，为将式(I)所示化合物与载体蛋白偶联得到的偶联物。所述载体蛋白为牛血清白蛋白或卵清白蛋白。式(I)所示化合物与载体蛋白的偶联比具体可为(8-11)∶1。所述偶联比指的是摩尔比。式(I)所示化合物与所述载体蛋白可以以碳氮键偶联。沙丁胺醇的人工抗原在沙丁胺醇与载体蛋白间含有一个间隔臂。所述沙丁胺醇人工抗原可以作为免疫原也可以作为包被原。将所述沙丁胺醇人工抗原免疫动物，可获得高特异性的单克隆抗体和多克隆抗体，方法简便、易行。将所述沙丁胺醇人工抗原包被酶标板，也可以用于沙丁胺醇抗血清的检测。包被原与免疫原结构上的差异可以进一步提高检测的灵敏度和特异性。沙丁胺醇人工抗原如式(II)所示。

式(II)。

所述沙丁胺醇人工抗原可用于制备沙丁胺醇特异性抗体。所述抗体为单克隆抗体或多克隆抗体。

以所述沙丁胺醇人工抗原为免疫原制备得到的抗体也属于本发明的保护范围。所述抗体可为单克隆抗体或多克隆抗体。所述单克隆抗体具体可为抗沙丁胺醇单克隆抗体杂交瘤细胞2E9分泌的单克隆抗体。

本发明还保护一种杂交瘤细胞，命名为抗沙丁胺醇单克隆抗体杂交瘤细胞2E9，简称杂交瘤细胞2E9，已于2012年2月15日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心(简称CGMCC，地址为：北京市朝阳区北辰西路1号院3号)，保藏号为CGMCC No.5791。

所述杂交瘤细胞2E9分泌的单克隆抗体也属于本发明的保护范围。

所述人工抗原可用于检测沙丁胺醇。

所述抗体(单克隆抗体或多克隆抗体)可用于检测沙丁胺醇。

本发明对于沙丁胺醇的检测具有重大价值。

附图说明

图1为沙丁胺醇人工抗原的紫外光谱图。

图2为沙丁胺醇的标准曲线图。

具体实施方式