[发明专利]一种青霉素酰化酶拆分生产手性氨基酸的方法及其产品

权利要求书

1.一种青霉素酰化酶拆分生产手性氨基酸的方法，其特征在于，包括以下步骤：

(1)在水中，在NaOH作用下，DL-氨基酸与苯乙酰氯进行乙酰化反应，将所得反应溶液的pH值调节到0.5～2.0，过滤回收N-DL-苯乙酰化-氨基酸固体，加水溶解；

(2)向步骤(1)所得溶液中加入阳离子交换树脂进行吸附反应，然后过滤收集滤液即N-DL-苯乙酰化-氨基酸溶液；

(3)将步骤(2)所得滤液的pH值调节到7.5～8.0，加入青霉素酰化酶进行酶促拆分反应，将所得反应溶液去除青霉素酰化酶后浓缩，加入醇类溶剂降温结晶，所述醇类溶剂选自甲醇、乙醇、乙二醇、正丙醇、异丙醇和丁醇中的一种或几种，过滤回收固体，即得L-氨基酸，收集滤液；

(4)将步骤(3)所得的滤液浓缩后调节pH值到0.5～2.0，过滤回收固体即N-苯乙酰基-D-氨基酸，该固体中加入酸进行水解反应，将水解产物浓缩，结晶，过滤回收固体，即得D-氨基酸；

(5)将步骤(3)或(4)所得L-氨基酸或D-氨基酸加入到温度为60～70℃的醇类溶剂中，所述醇类溶剂选自甲醇、乙醇、乙二醇、正丙醇、异丙醇和丁醇中的一种或几种，加入至过饱和状态，然后将该溶液降温结晶，过滤回收固体产物即可。

2.如权利要求1所述方法，其特征在于，步骤(1)所述DL-氨基酸选自DL-蛋氨酸、DL-丙氨酸、DL-谷氨酸、DL-天冬氨酸、DL-苯丙氨酸、DL-苯甘氨酸、DL-缬氨酸、DL-亮氨酸、DL-赖氨酸、DL-鸟氨酸、DL-叔亮氨酸、DL-对氟苯甘氨酸和DL-邻氯苯甘氨酸中的一种或几种。

3.如权利要求1所述的方法，其特征在于，步骤(1)所述DL-氨基酸与NaOH的摩尔比是1∶1～1∶4，所述溶解步骤是将N-DL-苯乙酰化-氨基酸固体溶解于质量比为2～10倍的水中。

4.如权利要求1所述的方法，其特征在于，步骤(2)所述阳离子交换树脂选自强酸性阳离子交换树脂、弱酸性阳离子交换树脂和大孔阳离子交换树脂中的一种或几种，所述的阳离子交换树脂用量为水溶液中游离氨基酸量的1.5～5倍(摩尔比)。

5.权利要求1所述的方法，其特征在于，步骤(2)所述阳离子树脂吸附反应的时间为1～30分钟。

6.如权利要求1所述的方法，其特征在于，步骤(3)所述青霉素酰化酶是固定化青霉素酰化酶，所述酶促拆分反应的时间为12～48小时，拆分反应的温度为25～40℃，拆分反应的pH值为7.0～8.0。

7.如权利要求1所述的方法，其特征在于，步骤(4)所述浓缩步骤是二次浓缩：将所得的滤液浓缩至出现固体后停止浓缩，按照剩余浓缩液体积的一倍补水，然后再浓缩至浓缩液出现固体后停止浓缩，其中所述加入酸进行水解反应是加入盐酸进行水解反应。

8.如权利要求1所述的方法，其特征在于，步骤(5)所述结晶温度为45～60℃。

9.如权利要求1～8任一项所述方法制备的手性氨基酸产品。

10.如权利要求9所述手性氨基酸产品在制备手性药物中的应用。