[发明专利]番鸭细小病毒病和番鸭呼肠孤病毒病二联活疫苗

说明书

技术领域

本发明涉及番鸭细小病毒病和番鸭呼肠孤病毒病二联活疫苗，属于预防兽医学领域。

背景技术

番鸭细小病毒病(俗称“三周病”)是1987年在我省首次发生的1-3周龄雏番鸭以喘泻为临床症状的一种新疫病。该病主要侵害7-21日龄的雏番鸭，发病率27-62％和病死率22-43％，病愈鸭大部分成为僵鸭，给番鸭业造成很大经济损失。番鸭呼肠孤病毒病(俗称“肝白点病”、“花肝病”、“白点病”、“肝脾白点病”和“番鸭坏死性肝炎”等)是1997年以来，在福建省莆田、福清、福州、长乐和浙江金华、广东佛山等地番鸭饲养区发生一种临床上以软脚为主要症状，以肝、脾表面有多量白点、肾脏肿大、出血、表面有黄色条斑为主要病理变化的传染病。该病只发生于番鸭，发病日龄为7～45日龄，以10～30日龄的雏番鸭为最甚。发病率为30～90％，病死率为60～80％，发病未死鸭耐过后成为僵鸭，给番鸭业造成很大经济损失。

目前，番鸭细小病毒病和番鸭呼肠孤病毒病仍是严重危害番鸭养殖业的重要传染病，疫苗的免疫接种可有效控制这二种新发疫病，而多次免疫对番鸭群易造成不良的应激反应。为此，本发明在国内外首次研制出番鸭呼肠孤病毒病和番鸭细小病毒病二联活疫苗。

发明内容

本发明的目的是提供番鸭细小病毒病和番鸭呼肠孤病毒病二联活疫苗，本发明是通过如下技术方案来实现的：

a、来源于人工致弱的番鸭细小病毒弱毒P1株(MPV-P1株)，保藏在中国典型培养物保藏中心(China Center for Type Culture Collection，简称：CCTCC)，保藏单位CCTCC地址在中国武汉市武汉大学，保藏日2010年6月2日，保藏编号：CCTCCNO：V201013；

b、来源于人工致弱的番鸭肝白点病(番鸭呼肠孤病毒病)弱毒MWCA株，该毒株保藏在在中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心(简称：CGMCC)，保藏单位地址在北京市朝阳区北辰西路1号院中国科学院微生物研究所，保藏日2001年12月18日，保藏编号：CGMCC0667；

将上述的番鸭肝白点病弱毒MWCA株和番鸭细小病毒弱毒P1株应用于制备番鸭细小病毒病和番鸭呼肠孤病毒病二联活疫苗。

与现有技术相比，本发明以番鸭细小病毒弱毒P1株(MPV-P1株)和番鸭肝白点病弱毒MWCA株(即：番鸭呼肠孤病毒弱毒CA株)为种毒，分别应用番鸭胚成纤维细胞和SPF鸡胚成纤维细胞转瓶培养技术增殖病毒，收获细胞毒液，按适当比例混合后加冻干保护剂冷冻干燥，研制成遗传性稳定、安全性好、免疫原性强且成本低的二联活疫苗，在流行番鸭三周病和肝白点病的番鸭养殖地区应用，能达到一次免疫接种即可同时预防和控制这二种疫病的目的，1-2日龄雏番鸭免疫一次即可有效预防番鸭细小病毒病和番鸭呼肠孤病毒病，不仅减少了人力物力，也减少因多次免疫注射对鸭群造成的不良应激反应；本发明适于GMP条件下的大规模生产。

具体实施方式

以下结合具体实施例对本发明进一步说明。(但不是对本发明的限制)。

a、来源于人工致弱的番鸭细小病毒弱毒P1株(MPV-P1株)，是利用番鸭胚和番鸭胚成纤维细胞交替传代等生物技术人工选育致弱而成，已失去对一日龄雏番鸭的致病性，并具有如下特性(1)病毒效价：MPV-P1株对番鸭胚成纤维单层细胞TCID₅₀≥10^-50/0.1ml；(2)安全性：用1日龄健康易感雏番鸭10羽，每羽腿部肌肉注射毒种原液0.2毫升，观察20天，应全部存活；(3)免疫原性：一日龄健康敏感雏番鸭，腿部肌肉注射0.2毫升，其最小免疫量为100TCID₅₀。MPV-P1株保藏在CCTCC，保藏日2010年6月2日，保藏编号CCTCCV201013；