[发明专利]一种测定水中叶绿素a的方法

权利要求书

1.一种测定水中叶绿素a的方法，其特征在于测定水中叶绿素a的方法，按以下步骤进行：

一、取50～200ml水样，采用0.45μm醋酸纤维滤膜进行过滤，真空泵压力控制在0.05MPa，获得截留有藻细胞的滤膜；二、将截留有藻细胞的滤膜剪碎放入装有6ml体积浓度为90％的乙醇溶液的离心管中，置于4℃冷藏12～24h；三、然后将离心管于8000r/min离心15min，收集上清液，再向离心管中补加4ml体积浓度为90％的乙醇溶液，再于8000r/min离心5min，收集上清液，合并两次离心获得的上清液，并加入质量浓度为90％的乙醇溶液定容至10ml，得萃取液；四、将萃取液于8000r/min离心5min，得萃取液上清液，以质量浓度为90％的乙醇溶液做参比，用分光光度计测定萃取液上清液在630nm、647nm、664nm和750nm波长下的吸光度值，按以下公式计算水体中叶绿素a的含量：Chla＝[12.12(D664-D750)-1.58(D647-D750)-0.08(D630-D750)]Ve/V；其中Chla为水样中叶绿素a的含量，μg/L；D630、D647、D664和D750分别为萃取液上清液在630nm、647nm、664nm和750nm波长下的吸光度值；Ve为萃取液的总体积，ml；V为抽滤的水样体积，L。

2.根据权利要求1所述的一种测定水中叶绿素a的方法，其特征在于步骤一中取50ml水样。

3.根据权利要求1所述的一种测定水中叶绿素a的方法，其特征在于步骤一中取200ml水样。

4.根据权利要求1所述的一种测定水中叶绿素a的方法，其特征在于步骤一中取100ml水样。

5.根据权利要求1所述的一种测定水中叶绿素a的方法，其特征在于步骤一中取150ml水样。

6.根据权利要求1或2所述的一种测定水中叶绿素a的方法，其特征在于步骤二中置于4℃冷藏12h。

7.根据权利要求1或2所述的一种测定水中叶绿素a的方法，其特征在于步骤二中置于4℃冷藏24h。

8.根据权利要求1或2所述的一种测定水中叶绿素a的方法，其特征在于步骤二中置于4℃冷藏16～20h。