[发明专利]一种四倍体萝卜的育种方法

说明书

技术领域

本发明涉及一种萝卜的育种方法，尤其是一种四倍体红心红皮萝卜的育种方法，属于植物育种技术领域。

背景技术

“红心萝卜又名胭脂萝卜，以皮肉全红、质地脆嫩而闻名，在贵州、四川及重庆等地广泛栽培”（见科学技术文献出版社出版的《中国萝卜》，P172页）。红皮红心萝卜系十字花科萝卜属萝卜种下的一个地方品种。

主产重庆市涪陵区，临近县市及四川、贵州等省也有栽培。其肉质根皮根肉均为红色，色素含量丰富，其可食部分质地紧密、粗糙、不宜生食但可用于腌制泡菜。近年来，多用红皮红心萝卜提取萝卜红色素。萝卜红色素是一种天然食用色素，安全、无毒、无任何负作用、资源丰富，而且具有一定营养和药理作用（Annamaryju等人，Photochmistry, 1997, 45 (4):671-674），是国家添加剂标准委员会允许使用的天然色素之一。在食品、化妆、医药领域有着巨大的应用潜力。萝卜红色素的开发利用，红色素含量和产量高的品种是基础。以前，红皮红心萝卜一直是由农民自繁自种，导致种子混杂、退化严重，萝卜红色素含量减少。经过科研人员的不懈努力，通过收集、整理传统资源，现已繁育出不少红色素含量较高的品种，其红色素含量在12%左右。除传统繁育方法之外，还有通过化学处理获得多倍体植物的方法，所获得的多倍体植物在产量和营养品质上较同源二倍体品种有明显优势，如张红亮等人（南京农业大学学报，2008，31（3）：47-50）采用秋水仙碱诱导获得了普通四倍体萝卜，发现其产量和营养品质各指标如维生素、可溶性糖、有机酸、可溶性糖、还原糖，均较同源二倍体品种有明显优势，其植株形态特征均比二倍体高，且差异显著。虽然多倍体植物体内化学成分含量比同源二倍体含量高很多，但是多倍体往往结实率低或完全不育，红色素含量的高低更是未知。

发明内容

本发明要解决的技术问题是：针对现有红皮红心萝卜产量和红色素含量较低的缺陷，提出一种四倍体红心红皮萝卜的育种方法，提高红心红皮萝卜的产量和红色素含量。

本发明通过以下技术方案解决技术问题，一种四倍体红心红皮萝卜的育种方法，包括以下步骤：

    步骤一、选取健康饱满的红心红皮萝卜种子，表面消毒30-60秒后，用氯化汞溶液浸泡处理12-15分钟，再用无菌水冲洗干净，一般冲洗3-5遍；

步骤二、将无菌的红心红皮萝卜种子接种至MS发芽培养基，在25±3℃、14±2 h·d^-1的条件下培养3-5天，得到无菌红心红皮萝卜苗；

步骤三、将含子叶生长点的无菌红心红皮萝卜苗切取接种至MS液体诱导培养基中，在14±2h·d^-1光照下振荡诱导培养12～72小时；

步骤四、将诱导培养过的无菌红心红皮萝卜苗接种至固体分化培养基中，在25±3℃、光照时间为14±2 h·d^-1、光照强度为2000±1000lux的条件下培养，直至分化，生成再生芽；

步骤五、切取再生芽接种至生根培养基，经炼苗后移栽至田间，得到再生植株，即四倍体红心红皮萝卜植株。

所用的红心红皮萝卜种子选取纯合二倍体红心红皮萝卜种子。

所述MS发芽培养基是由MS培养基1L、蔗糖20g～30g和8g～9g琼脂组成，pH为5.8～6.0。

所述MS液体诱导培养基由MS培养基1L、0.1～0.2 mg NAA 、5.0mg ～6.0mg 6-BA、50mg～200 mg 秋水仙碱组成，pH5.8～6.0。

所述固体分化培养基由MS培养基1L、0.1mg～0.2 mg NAA 、5.0 mg～6.0 6-BA、20 g～30g蔗糖、8～9g琼脂组成，pH5.8～6.0。

所述生根培养基由MS培养基1L、0.2～0.3 mg NAA 、20 g～30g蔗糖、8～9 g琼脂组成，pH5.8～6.0。