[发明专利]一种组织工程人角膜基质载体支架及其制备方法

权利要求书

1.组织工程人角膜基质载体支架，其特征在于所述的载体支架是以鱼皮胶原蛋白复合硫酸软骨素制备出的。

2.如权利要求1所述的载体支架，其特征在于所述的鱼皮胶原蛋白的质量百分比为20％-40％，硫酸软骨素的含量为60％-80％。

3.权利要求1所述的载体支架的制备方法，其特征在于包括如下步骤：

1)将海水鱼类非酶解鱼皮胶原蛋白冻干粉溶解于盐酸中制成干粉溶液，离心过滤后加入到培养孔中冷冻干燥冻干；

2)将N-羟基琥珀酰亚胺NHS溶解于2-吗啉乙磺酸-40％乙醇溶液中，制成NHS溶液，再加入1-乙基-3-(3-二甲基氨丙基)-碳化二亚胺溶液混匀制成交联剂溶液，最后加入硫酸软骨素，制成含硫酸软骨素的交联剂溶液；

3)向含有海水鱼类非酶解鱼皮胶原蛋白冻干粉的培养孔中加入含硫酸软骨素的交联剂溶液，于室温下交联处理后，用Na₂HPO₄溶液清洗稳定交联效果；再用NaCl溶液清洗去除交联剂；最后，用蒸馏水清洗冻干后完成支架的制备。

4.如权利要求3所述的制备方法，其特征在于所述的步骤1)中盐酸浓度为0.01M-0.02M，制成的干粉溶液的浓度为5mg/ml-10mg/ml。

5.如权利要求3所述的制备方法，其特征在于所述的步骤1)的干粉溶液中又添加了质量百分比为0.05％-0.1％的IV型胶原蛋白。

6.如权利要求3或5所述的制备方法，其特征在于所述的步骤1)的干粉溶液中又添加了质量百分比0.05‰-0.1‰的纤连蛋白。

7.如权利要求3所述的制备方法，其特征在于所述的步骤2)中的N-羟基琥珀酰亚胺溶解于50mM的2-吗啉乙磺酸-40％乙醇溶液中，制成6mM的N-羟基琥珀酰亚胺溶液。

8.如权利要求3所述的制备方法，其特征在于所述的步骤2)中的硫酸软骨素在含硫酸软骨素的交联剂溶液中的终浓度为2.4％-2.5％。

9.如权利要求1所述的载体支架，其特征在于所述的海水鱼类非酶解鱼皮胶原蛋白冻干粉为鳕鱼等深海鱼皮非酶解胶原蛋白冻干粉。