[发明专利]考马斯亮蓝染色液及其染色方法和在蛋白检测中的应用

权利要求书

1.一种考马斯亮蓝染色液，其特征在于，所述染色液是包含体积百分浓度为10％～20％的醇，体积百分浓度为4.5％～10％的酸，质量体积浓度为5％～10％的硫酸铵，质量体积浓度为0.01％～0.1％的考马斯亮蓝的水溶液；

所述醇包括甲醇和乙醇中的至少一种；

所述酸包括磷酸和乙酸中的至少一种；

所述考马斯亮蓝包括G250和R250中的至少一种。

2.根据权利要求1所述的考马斯亮蓝染色液，其特征在于，所述染色液是包含体积百分浓度为10％～20％的醇，体积百分浓度为4.75％～8.5％的酸，质量体积浓度为5％～8.5％的硫酸铵，质量体积浓度为0.01％～0.1％的考马斯亮蓝的水溶液；

所述醇包括甲醇和乙醇中的至少一种；

所述酸包括磷酸和乙酸中的至少一种；

所述考马斯亮蓝包括G250和R250中的至少一种。

3.根据权利要求2所述的考马斯亮蓝染色液，其特征在于，所述染色液是包含体积百分浓度为15％～20％的乙醇，体积百分浓度为4.75％～8.5％的磷酸，质量体积浓度为5％～8.5％的硫酸铵，质量体积浓度为0.01％～0.03％的考马斯亮蓝G250的水溶液。

4.一种考马斯亮蓝染色方法，其特征在于，包括以下步骤：

A.染色：将SDS-PAGE胶置于考马斯亮蓝染色液中，染色45min以上；

B.脱色：用水冲洗染色后的SDS-PAGE胶，将染色液冲洗干净即可；

所述考马斯亮蓝染色液是包含体积百分浓度为10％～20％的醇，体积百分浓度为4.5％～10％的酸，质量体积浓度为5％～10％的硫酸铵，质量体积浓度为0.01％～0.1％的考马斯亮蓝的水溶液；

所述醇包括甲醇和乙醇中的至少一种；

所述酸包括磷酸和乙酸中的至少一种；

所述考马斯亮蓝包括G250和R250中的至少一种。

5.根据权利要求4所述的考马斯亮蓝染色方法，其特征在于，在步骤A之前还包括步骤：

A’.固定：将SDS-PAGE胶在固定液中固5min～30min；所述固定液是包含体积百分浓度为20％～50％的醇，体积百分浓度为1％～5％的酸的水溶液；

所述醇包括甲醇和乙醇中的至少一种；

所述酸包括磷酸、乙酸和三氯乙酸中的至少一种。

6.根据权利要求5所述的考马斯亮蓝染色方法，其特征在于，步骤A’所述固定液是包含体积百分浓度为25％～35％的乙醇，体积百分浓度为3％～5％的磷酸的水溶液；固定时间为10min～20min。

7.根据权利要求5所述的考马斯亮蓝染色方法，其特征在于，在步骤A’之前还包括步骤A”.漂洗：用水冲洗SDS-PAGE胶。

8.根据权利要求4至7中任一项所述的考马斯亮蓝染色方法，其特征在于，步骤A所述染色液是包含体积百分浓度为10％～20％的醇，体积百分浓度为4.75％～8.5％的酸，质量体积浓度为5％～8.5％的硫酸铵，质量体积浓度为0.01％～0.1％的考马斯亮蓝的水溶液；

所述醇包括甲醇和乙醇中的至少一种；

所述酸包括磷酸和乙酸中的至少一种；

所述考马斯亮蓝包括G250和R250中的至少一种。

9.根据权利要求8所述的考马斯亮蓝染色方法，其特征在于，步骤A所述染色液是包含体积百分浓度为15％～20％的乙醇，体积百分浓度为4.75％～8.5％的磷酸，质量体积浓度为5％～8.5％的硫酸铵，质量体积浓度为0.01％～0.03％的考马斯亮蓝G250的水溶液，染色时间为45min～70min。

10.根据权利要求1至3中任一项所述考马斯亮蓝染色液在蛋白质的定性和/或定量检测中的应用。