[发明专利]一种利用线虫鉴定地沟油的方法

说明书

技术领域

本发明涉及一种鉴定地沟油的方法。

背景技术

地沟油，泛指在生活中存在的各类劣质油，如回收的食用油、反复使用的炸油，以及通过过滤、加热、沉淀、分离等方法对城市下水道里的垃圾加工而成的“食用油”。“地沟油”是一种质量极差、极不卫生的非食用油。一旦食用“地沟油”，它会破坏人们的白血球和消化道黏膜，引起食物中毒，甚至致癌的严重后果。地沟油回流到餐桌的现象在中国普遍存在并在近年被广泛关注，而鉴定地沟油成为难题。目前国内尚未有检测地沟油的统一标准。单凭人的感官，地沟油的色、香、味与普通食用油几乎没有分别。即便是能探明底细的仪器也常常难以辨别真假。见诸报道的地沟油检测方法都存在一定盲区，准确率也有待提高，尚不足以对地沟油进行充分有效的鉴定。

一般地沟油中含有胆固醇类物质，而植物油中没用这类具有动物油属性的成分；即使地沟油经过数级精炼，胆固醇也会痕量存在。常规的通过胆固醇检测鉴定地沟油的方法，具有操作复杂、仪器依赖度大、成本较高的不足，而且常规胆固醇检测方法5mg/g(10％)检出限较高，无法针对特异成分痕量低的高精炼地沟油进行检测。

发明内容

本发明目的是为了解决常规的通过胆固醇检测鉴定地沟油的方法，具有操作复杂、仪器依赖度大、成本较高的不足，而且无法针对特异成分痕量低的高精炼地沟油进行检测的问题，而提供一种利用线虫鉴定地沟油的方法。

利用线虫鉴定地沟油的方法按以下步骤实现：

一、将17g的琼脂粉、2.5g的蛋白胨、0.11g的CaCl₂、0.12g的MgSO₄、3g的NaCl和25mL磷酸盐缓冲液，加蒸馏水定容至1000ml，然后放入高压蒸汽灭菌锅中于120℃灭菌20min，再降温至50～60℃，然后在无菌环境下加入1～10ml的待检测食用油，获得培养基，再倒入培养皿；

二、培养皿中的培养基凝固8～12h后接入5～10只线虫幼虫进行观察，若幼虫生长缓慢，超过36h后才能发育为成虫且成虫体型明显瘦小，活动能力减弱，运动行为衰退，则待检测食用油不是地沟油；若24h内可发育为成虫且生长和活动状况良好，则待检测食用油是地沟油，即完成利用线虫鉴定地沟油。

本发明通过对线虫生长观测和行为观察，借助胆固醇这样关键因子对地沟油进行判断。胆固醇是线虫的关键生长因子，在缺乏胆固醇的线虫培养基中，线虫发育明显滞后和不足；地沟油中普遍含有胆固醇，在无胆固醇成分的培养基中添加微量地沟油，线虫生长状况与含有胆固醇成分的培养基中生长的线虫毫无差别。将疑似地沟油添加入无胆固醇成分的线虫培养基中，如果此培养基上生长的线虫生长良好、行为正常，与正常培养基生长的线虫无差别，便可确定此类食用油为地沟油。

本发明与传统的利用分析仪器鉴定地沟油的方法相比，弥补了常规胆固醇检测方法5mg/g(10％)检出限较高的不足，对特异成分痕量低的高精炼地沟油可以有效鉴定。利用线虫生长和行为指标，可以直观高效的甄别食用油的质量优劣。此外，本检测方法对实验条件要求低，不需要特殊的高精分析仪器和检测设备，实验操作方便，灵敏度高，准确度好，成本低廉，易于培训和掌握。

附图说明

图1为实施例中幼虫长至成虫时间，以幼虫生长产卵小时数计的柱状图；图2为实施例中线虫头摆率的柱状图。

具体实施方式

具体实施方式一：本实施方式利用线虫鉴定地沟油的方法按以下步骤实现：

一、将17g的琼脂粉、2.5g的蛋白胨、0.11g的CaCl₂、0.12g的MgSO₄、3g的NaCl和25mL磷酸盐缓冲液，加蒸馏水定容至1000ml，然后放入高压蒸汽灭菌锅中于120℃灭菌20min，再降温至50～60℃，然后在无菌环境下加入1～10ml的待检测食用油，获得培养基，再倒入培养皿；

二、培养皿中的培养基凝固8～12h后接入5～10只线虫幼虫进行观察，若幼虫生长缓慢，超过36h后才能发育为成虫且成虫体型明显瘦小，活动能力减弱，运动行为衰退，则待检测食用油不是地沟油；若24h内可发育为成虫且生长和活动状况良好，则待检测食用油是地沟油，即完成利用线虫鉴定地沟油。

本实施方式步骤一中待检测食用油为疑似地沟油的食用油。

本实施方式中24h内可发育为成虫且生长和活动状况良好，是指幼虫在24h内开始产卵，即发育为健康正常的成虫，以头摆率为指标表征其活动状况良好。