[发明专利]眼镜蛇毒神经生长因子在制备预防和治疗肝纤维化和肝硬化的药物中的应用

说明书

技术领域

本发明涉及眼镜蛇毒神经生长因子的医药新用途，尤其是眼镜蛇毒神经生长因子在制备预防和治疗肝纤维化和肝硬化的药物中的应用。

背景技术

流行病学调查显示，在我国乙型肝炎尤其是慢性活动性肝炎中，有10％-15％可能在5-10年内发展为肝炎后肝硬化。我国慢性肝炎患者约有3千万人，这些患者均有可能或己经发展为肝纤维化。由于由肝炎病毒引起的肝脏损伤缺乏有效的根除方法，常会缓慢发展成肝纤维化，最后发生肝硬化，可见，由肝炎病毒感染导致肝纤维化严重危害性。除肝炎病毒感染外，寄生虫感染、酒精、营养不良和辐射等均可导致肝纤维化，如在我国有饮白酒的习惯，酒精性肝纤维化病例比较多见。因此，肝纤维化的群体是十分巨大的。如何控制慢性肝病的发展，防止肝纤维化以致肝硬化的发生和抗肝纤维化治疗及逆转肝纤维化的进程，日益受到国内外的高度重视。肝纤维化是慢性肝病发展成为肝硬化的主要中心环节，有效治疗肝纤维化可以防止各种慢性肝病向肝硬化、肝癌发展。为此，探索肝纤维化防治的有效方法是非常必要和迫切，具有十分重要的意义。近几十年来人们一直在寻找预防和治疗肝纤维化的药物，并已开发出了一些治疗肝纤维化的药物，如秋水仙碱、氧化苦参碱、干扰素、促肝细胞生长素等，中药制剂有丹参注射液、软肝片等。然而，由于副作用或使用效果不佳等原因，这些药物未能达到令人满意的治疗效果。因此，研究和开发新型抗肝纤维化的药物是一项尤为紧迫的任务。

发明内容

本发明要解决的技术问题是提供一种眼镜蛇毒神经生长因子(Nerve Growth Factor，NGF)在制备预防和治疗肝纤维化和肝硬化的药物中的应用，将眼镜蛇毒神经生长因子作为药物的主要活性成分，其疗效好、起效快、安全有效、毒副作用小，是预防和治疗肝纤维化和肝硬化的理想药物。

为解决上述技术问题，本发明采用如下技术方案：

眼镜蛇毒神经生长因子在制备预防和治疗肝纤维化和肝硬化的药物中的应用。

眼镜蛇毒神经生长因子具有序列表SEQ.ID.No.2的氨基酸序列。

眼镜蛇毒神经生长因子是由具有序列表SEQ.ID.No.1的碱基序列的眼镜蛇基因组DNA编码的。

眼镜蛇毒神经生长因子的分子量为22.3KD。

上述药物可制成胶囊、软胶囊、片剂、混悬剂、糖浆剂、注射剂或粉剂。

肝纤维化的形成，主要是由于肝星状细胞(hepatic stellate cells，HSCs)激活，细胞外基质(extracellular matrix，ECM)生成过多、降解相对不足，在肝内大量沉积所致。HSCs是肝纤维化形成过程中合成ECM的最主要细胞。HSCs的活化、增殖是肝纤维化发生的中心环节。因此，抑制HSCs增殖、诱导其凋亡是抗肝纤维化的重要策略。发明人在研究眼镜蛇毒神经生长因子(NGF)发现，其可诱导HSC-T6凋亡，在细胞水平上具有抗肝纤维化作用。动物实验证明，眼镜蛇毒神经生长因子在动物体内具有抗肝纤维化作用，能够有效抑制或减轻肝纤维化程度。因此，眼镜蛇毒神经生长因子应用在制备预防和治疗肝纤维化和肝硬化的药物中有重要价值，可为人们提供一种疗效优良、毒副作用很低的预防和治疗肝纤维化和肝硬化的药物。

附图说明

图1是眼镜蛇毒NGF SDS-PAGE电泳图，图中VI峰为眼镜蛇毒NGF，Marker是蛋白分子量标准。

图2是HSC-T6生长曲线图，图中：1至8分别为接种密度5×10⁴、1×10⁵、2.5×10⁴、1.25×10⁴、6.25×10³、3.12×10³、1.56×10³、7.81×10²。

图3是眼镜蛇毒NGF作用HSC-T6生长柱形图。

图4是眼镜蛇毒NGF作用HSC-T6细胞HE染色图，图中：A对照组，B NGF 2ug/ml，C NGF 5ug/ml。

图5是眼镜蛇毒NGF作用HSC-T6形态学观察图，图中：A对照组，B NGF 2.5ug/ml，C NGF 5ug/ml，D NGF 7.5ug/ml。

图6是眼镜蛇毒NGF作用HSC-T6细胞电镜观察图，图中：A NGF 2ug/ml，B NGF 5ug/ml。