[发明专利]一种激光显微切割后收集细胞的收集装置、方法及系统

说明书

技术领域

本发明涉及一种激光显微切割后收集细胞的收集装置、方法及系统。

背景技术

在生命科学研究中，需要对组织中某一特定的细胞(群)进行基因和蛋白质研究。激光显微细胞切割装置或系统就是为满足这样的需要而发展起来的一种高端设备，可以从多样性的组织中分离出来某一特定的或有某一特点的细胞(群)，从而避免实验标本被其他细胞、细菌、或其它杂质所污染，使基因和蛋白的分析更加准确，特异性更高。区别各种激光显微细胞切割系统的核心技术是对切割后细胞进行无污染收集的不同收集方法或装置。

美国专利US 7807108B2、US 6907798B2等公布了细胞收集装置，该装置放置于样品的正下方，激光切割后所需要收集的细胞(群)自动掉入该装置的细胞收集器中。该装置或方法的缺点是只能置于正置激光显微切割系统中，必须利用重力才能实现对切割后细胞的收集。

美国专利US7318999B2公布一种激光捕获显微切割技术(LCM)，该技术可以用于倒置激光显微细胞切割系统中。该技术采用激光束加热融化化特殊的具有热融性质的薄膜，薄膜受热后体积膨胀并具有黏附性，包绕所需要分离的组织细胞并和该细胞(群)粘黏，薄膜分离式，将与其粘黏的目标组织从组织切片上分离。该方法的缺点是精度较低，难以对小面积细胞或单个细胞进行分离。

WO97/29355A公布了一种利用激光弹射技术来收集切割后细胞的方法。该方法可以用于倒置激光显微细胞切割系统中。该方法对切割用聚焦激光束进行散焦，使得焦点低于样品面，发射脉冲激光束，利用激光脉冲产生的压力将切割后组织弹射入细胞收集其中。该方法优点缺点是不能将大块细胞(群)弹射入收集其中。另外激光束会对生物组织活性有一定程度的损伤。

为了克服以上细胞收集方法的缺点，中国专利ZL 200510034838.3公布了使用预先带负电荷的聚酰亚胺薄膜及带有正电荷的收集器来收集切割后细胞的方法，该方法使用新近购买的预先带有负电荷的聚酰亚胺薄膜时，能够获得较理想的细胞收集率。然而，该方法有如下缺点，第一：只能适用于聚酰亚胺薄膜，而且是预先带有负电荷的聚酰亚胺薄膜，满足此要求的材料在市场上不易找到。第二：由于工业界难以生产厚度低于2微米的聚酰亚胺薄膜，而较厚的薄膜激光难以切割或在切割后在切割线边缘留下烧焦痕迹。第三：难以将带有负电荷的聚酰亚胺薄膜平铺在显微镜用载玻片上。第四带有负电荷的聚酰亚胺薄膜在储存过程中其电荷容易流失而使得细胞收集效率降低。第五，难以找到带有正电荷的收集材料(琼脂不带电)，即便找到，带有正电荷的收集材料随着陈放其上电荷易于流失。

发明内容

为解决现有技术中存在的技术问题，本发明提供了一种激光显微切割后收集细胞的收集装置、方法及系统。采用该装置、方法及系统，其对细胞组织样品的收集过程简单，并且在收集的过程中，不会对似收集的细胞组织样品造成损坏，为后续细胞组织的分析提供纯净、无污染、无损伤的标本。

本发明解决上述技术问题，所提供的技术问题是：提供一种激光显微切割后收集细胞的收集装置，包括，样品载体(10)，该样品载体(10)的两侧分别设有透明薄膜层(12)、绝缘层(13)，透明薄膜层(12)的周沿与样品载体(10)贴合且透明薄膜层(12)上设有细胞组织样品(15)，绝缘层(13)与样品载体(10)之间设有第一电极(14)；样品收集器(20)，该样品收集器(20)内装有对细胞组织具有粘附作用的细胞黏附材料(21)，该样品收集器(20)上还设有激光照射后发生光电反应的光敏材料(22)；供电装置(30)，该供电装置(30)的正极与第一电极(14)通过第一开关(31)进行断合；其中，在显微观察及激光切割细胞过程中，第一开关(31)闭合，供电装置(30)的正极与第一电极(14)相连而使第一电极(14)带正电位；激光源(68)发出的激光束(40)及显微装置(60)的光源照射至光敏材料(22)上，光敏材料(22)在光照射下产生的电子飞向带正电位的第一电极(14)而被细胞组织样品(15)及透明薄膜材料(12)捕获，使得组织样品(15)及透明薄膜材料(12)带上负电荷，而光敏材料(22)带上正电荷；随后，在用户选定切割局部细胞组织样品(15)及其附着的透明薄膜层(12)后；断开第一开关(31)，被激光束(40)切割下的细胞组织样品(15)及其附着的透明薄膜层(12)被带有正电荷的光敏材料(22)吸引而飞向两者之间的细胞黏附材料(21)并被捕获，实现切割后的细胞组织样品(15)收集。