[发明专利]简易的低聚木糖平均聚合度的测定方法

说明书

技术领域

本发明涉及测定方法，具体涉及一种简易的低聚木糖平均聚合度的测定方法。

背景技术

低聚木糖亦称木寡糖(xylooligosaccharides) ，由2~7 个D-木糖以β-1 ，4-木糖苷键结合而成，是功能性低聚糖家族中的一个重要成员。 它的甜度比蔗糖和葡萄糖均低，与麦芽糖差不多，约为蔗糖的40%。低聚木糖对pH 值及热的稳定性较好，即使是在酸性条件(pH=2.5 ~7)加热也基本不分解，适合用于酸奶、乳酸菌饮料和碳酸饮料等酸性饮料中。低聚木糖极难被消化吸收，肠道内残存率高，具有极好的双歧杆菌增殖性，其选择利用性高于其它功能性低聚糖。

由于低聚木糖是几种寡聚木聚糖的总称，其水溶液为混合物，因此在检测过程中对木聚糖的测定是通过测定各组分的浓度的方法来检测低聚木糖的，现在普遍采用高效液相色谱（HPLC）检测的方法（详见国标QB/T2984-2008），预先测定各组分的标样然后依次测定各组分浓度。此方法能详细的以具体数字的方式显示出低聚木糖各个组分的含量，但是由于市面上低聚木糖的标样不全，只能买到部分组分的标样，因此在定量计算时多采用其中一种组分的方程计算其他组分，造成了定量的不准确。此外使用HPLC方法检测，由于仪器昂贵、检测耗时较长，并且无法从宏观上对低聚木糖品质进行评价，造成表观上不直接，无法直观的对低聚木糖含量有直接的认识。国标GB/T23747-2009通过液相测定低聚木糖水解前后的木糖含量，计算出由低聚木糖水解所得的木糖含量并除以平均转化系数进而得到低聚木糖的浓度，通过此方法测定的低聚木糖浓度能直观的反应溶液中平均低聚木糖浓度。由于低聚木糖的聚合度越小，特别是木二的浓度越高该低聚木糖的品质越好，但由此国标测得的浓度对应的平均聚合度无法判断，因而无法宏观的判断低聚木糖的品质给宏观判定低聚木糖品质带来了不便。此外该方法同样需要HPLC，使得没有该设备的实验室、工厂判定困难。

由于每一个低聚木糖分子含有一个还原端糖，假设每一个低聚木糖总共含有n个木糖单元， 此时n为该低聚木糖的聚合度。n等同于通过完全水解低聚木糖所得到的还原性木糖的个数。 由于样品中含有聚合度和浓度不等的低聚木糖和木糖分子，因此为了方便说明低聚木糖中的聚合度和浓度等情况，采用平均聚合度N作为表征样品中聚合度的平均值。

其定义为：

N =样品中总糖浓度（所有低聚糖水解成单糖+起始单糖浓度）

还原糖浓度

通过低聚木糖溶液中总糖浓度和还原糖浓度可以测定低聚木糖在水溶液中的整体聚合度N，从而能对低聚木糖品质有个宏观的判定。当N=1则溶液中全为木糖，当N数值偏小则可以判定溶液中低聚木糖组分中聚合较小的组分含量较高。在分离纯化过程中N的变换能反映出各个组分在溶液中的变化情况。

发明内容

本发明的目的在于：提供一种简易的低聚木糖平均聚合度的测定方法，该测定方法对仪器要求不高，简单易于操作，通过测定平均聚合度这一宏观指标来直观的反应低聚木糖品质。

本发明的技术解决方案是该测定方法包括以下步骤：

（1） 标准样品测定低聚木糖液的总糖浓度：采用苯酚-浓硫酸法，苯酚-浓硫酸法测定步骤及标准曲线制备如下：⑴  标准木糖溶液的配制：先制备1mol/L的标准木糖液，再分别稀释到200、180、150、100、60、50、30、20、10 uM/L的木糖液；⑵  制备标准曲线：9支试管分别移取1ml的200、180、150、100、60、50、30、20、10 uM/L的木糖液，加入25ul的质量浓度80%的苯酚，迅速加入2.5ml的浓硫酸摇匀，静置10min，再置于25-30℃的恒温水池10-20min，取出冷却，在480nm测其吸光值；