[发明专利]一种青蟹成蟹荧光标记方法

说明书

技术领域

本发明属于荧光标记领域，特别涉及一种青蟹成蟹荧光标记方法。

背景技术

在海洋渔业资源工作和水产养殖工作中，常常需要对增殖放流的个体、进行遗传选育的个体进行标记，目前已经发展出多种水产物种标记方法。但是，蟹类的标记一直是一个难题，由于其表面被甲壳覆盖，且生长过程中多次蜕壳，断肢会在蜕壳后重新生长，导致多数标记方法都无法应用于蟹类。综合比较下来，荧光胶体标记技术操作简单，对生物损伤小，成本低，但必须克服蟹类具有甲壳，生长过程中会蜕壳的难点，所以也一直还未有令人满意的荧光标记方法。Davis曾将荧光胶体标签注射在蓝蟹幼蟹的游泳足的节肢中，但一旦蓝蟹长大，游泳足甲壳变厚后效果就很差了(Fisheries Research，2004，67：265-274)。Spilseth将荧光胶体注射到粗腿厚纹蟹成蟹的附肢的底节和基节的透明关节处(Crustaceana，2005，78：1383-1388)，但是这种标记方法观察时必须把每一只蟹分别捕捉，并翻过身来仔细察看，蟹处在养殖池中时因为只能看到头胸甲背面，无法直接观察到标记部位。王桂忠等将荧光胶体标记注射在青蟹幼蟹头胸部腹面皮层与肌肉的结合部分(国家发明专利申请201010283551.5)，但一旦幼蟹长大变成成蟹，则由于甲壳变厚难以观察到荧光标记，因为正常状况蟹都是腹面朝下，观察时要看腹部，必须把蟹捕捉上来或者把蟹翻转过来。

发明内容

本发明所要解决的技术问题是提供一种青蟹成蟹荧光标记方法，该方法操作简单，荧光胶体的颜色可以自由调配，对蟹类无损伤，对生长和活动无影响，也适用于其他具有游泳足的蟹类。

本发明的一种青蟹成蟹荧光标记方法，包括：

(1)配制荧光胶体标签，并将荧光胶体标签注入无菌注射器内待用；

(2)注射荧光标签时，将注射器针头沿着青蟹游泳足指节的中缝突起处插入，将注射器针头向外抽出，边抽边注射，使注射的荧光胶体呈均匀的长条状，注射器针头抽出后，用灭菌棉擦去注射器插入处周围残留的胶体。

所述步骤(1)中的荧光胶体标签的颜色为红色、黄色、绿色、橙色中的一种或几种，可与青蟹游泳足体色相区别。

所述步骤(2)中的青蟹为成蟹。

所述步骤(2)中的荧光标签长条的长度为青蟹游泳足指节的中缝突起处长度的一半以上。

有益效果

1)本发明可应用于青蟹成蟹的标记，虽然成蟹的甲壳变厚变不透明，但是游泳足指节的中缝突起处甲壳非常薄且透明，可清晰观察到注射的荧光胶体；

2)本发明注射的荧光胶体不会随青蟹蜕壳而而丢失；

3)本发明标记的荧光胶体，青蟹在养殖池中自然状态就可以观察到，无需把蟹体翻过来或者捕捉起来；

4)本发明操作简单，荧光胶体的颜色可以自由调配，对蟹类无损伤，对生长和活动无影响，也适用于其他具有游泳足的蟹类。

具体实施方式

下面结合具体实施例，进一步阐述本发明。应理解，这些实施例仅用于说明本发明而不用于限制本发明的范围。此外应理解，在阅读了本发明讲授的内容之后，本领域技术人员可以对本发明作各种改动或修改，这些等价形式同样落于本申请所附权利要求书所限定的范围。

实施例1

1)配制红色荧光胶体标签，并将荧光胶体标签注入无菌注射器内待用；

2)注射荧光标签时，将注射器针头沿着青蟹游泳足指节的中缝突起插入，将注射器针头向外缓慢抽出，边抽边注射，使注射的荧光胶体呈均匀的长条状，并达到青蟹游泳足指节的中缝突起处长度的一半以上，注射器针头抽出后，用灭菌棉擦去注射器插入处周围残留的胶体。

将注射后的青蟹放入养殖池中，投喂蛤蜊等鲜活饵料。观察并记录标记青蟹的死亡率和生长率。同对照组，雌雄各15只青蟹1个月后死亡率为0；生长率与对照组无显著差异；游泳足活动性能未见影响。连续2次蜕壳后荧光胶体均无丢失，依旧清晰可见。